疟原虫红外期相关蛋白种类及免疫反应特性是研制有效红外期疫苗、寻找药物靶标的基础。本项目以约氏疟原虫-斯氏按蚊模型,采用二维差异凝胶电泳(2-D DIGE)技术分离疟原虫感染肝脏蛋白,差减正常肝脏蛋白,检获疟原虫红外期相关蛋白组分;再经放射减毒子孢子感染小鼠血清免疫识别,筛选、鉴定出红外期疟原虫高表达蛋白;经MS、MS/MS获得相关蛋白的肽质量指纹图谱(PMF)和氨基酸测序结果,Mascot系统解析PMF信息和揭示疟原虫外期蛋白的编码氨基酸、基因序列;以Primer5.0分析、设计引物,RT-PCR扩增基因片段,通过蛋白真核表达、纯化分离获得红外期特异蛋白。将红外期疟原虫重组蛋白免疫小鼠,与放射减毒子孢子作比较,检测细胞免疫反应和对子孢子攻击感染的阻断作用。探讨疟原虫红外期免疫保护相关分子及介导消除性免疫机制,为研制有效的疟原虫红外期肽疫苗提供理论依据。
英文主题词Plasmodium yoelii,2DE,Mass spectrometry techniques(MS),Peptide mass fingerprints(PMF),Recombine proteins