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基于抑制消减杂交和比较蛋白质组学技术发掘阪崎肠杆菌毒力相关因子的研究
  • 项目名称:基于抑制消减杂交和比较蛋白质组学技术发掘阪崎肠杆菌毒力相关因子的研究
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 批准号:31201292
  • 申请代码:C200301
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2013-01-01-2015-12-31
  • 项目负责人:叶应旺
  • 依托单位:合肥工业大学
  • 批准年度:2012
中文摘要:

阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)是以奶粉为主要传播媒介的重要食源性致病菌,严重威胁到乳品的安全性,研究表明菌株间的毒力存在差异,但该菌的致病机制尚不清楚。本项目拟通过动物毒理实验,结合病理组织切片制作与分析,在确定菌株毒力差异基础上,主要开展两方面工作(1)运用抑制消减杂交技术(SSH)富集强、弱毒株差异表达基因,构建cDNA消减文库,检测阳性克隆子在强、弱毒株基因组中的分布,结合软件数据库分析,鉴定毒力相关基因;(2)采用蛋白质双向电泳技术(2-DE)分别构建强、弱毒株全细胞和膜蛋白质图谱,开展图谱中特征差异蛋白质的筛选与分析,结合质谱技术(MALDI TOF/TOF/MS)与软件数据库分析,鉴定毒力相关蛋白质分子。项目预期结果将从mRNA与蛋白质组水平揭示毒力相关基因和蛋白质,为阐明其致病机制奠定良好基础,同时为乳品中阪崎肠杆菌安全性检测提供重要的分子靶点。

结论摘要:

英文主题词Cronobacter;virulence;2-DE;Transcriptics;Biofilm formation


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