阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)是以奶粉为主要传播媒介的重要食源性致病菌,严重威胁到乳品的安全性,研究表明菌株间的毒力存在差异,但该菌的致病机制尚不清楚。本项目拟通过动物毒理实验,结合病理组织切片制作与分析,在确定菌株毒力差异基础上,主要开展两方面工作(1)运用抑制消减杂交技术(SSH)富集强、弱毒株差异表达基因,构建cDNA消减文库,检测阳性克隆子在强、弱毒株基因组中的分布,结合软件数据库分析,鉴定毒力相关基因;(2)采用蛋白质双向电泳技术(2-DE)分别构建强、弱毒株全细胞和膜蛋白质图谱,开展图谱中特征差异蛋白质的筛选与分析,结合质谱技术(MALDI TOF/TOF/MS)与软件数据库分析,鉴定毒力相关蛋白质分子。项目预期结果将从mRNA与蛋白质组水平揭示毒力相关基因和蛋白质,为阐明其致病机制奠定良好基础,同时为乳品中阪崎肠杆菌安全性检测提供重要的分子靶点。
英文主题词Cronobacter;virulence;2-DE;Transcriptics;Biofilm formation