本研究利用新型mPEG对重组屋尘螨主要变应原蛋白进行定点化学修饰,得到高纯度、稳定的尘螨变应原化学修饰疫苗;运用 SDS-PAGE、2D电泳、质谱、核磁共振等方法观察其分子量和结构等精确表征;通过ELISA和Western blot等方法观察定点化学修饰后变应原的免疫原性和反应原性;并经体外细胞学方法研究其对抗原呈递细胞和T细胞的作用机制。建立哮喘动物模型,观察尘螨变应原化学修饰疫苗免疫治疗效果,探讨哮喘小鼠Th1/Th2/Th0、IgE/IgG抗体的改变;以及诱导特异性T细胞免疫耐受的机制,以进一步阐明尘螨化学修饰变应原疫苗的免疫作用机理。 本研究着重对mPEG化学修饰尘螨变应原的生物和免疫学表征及特异性免疫治疗机理进行研究,通过基因工程和定点化学修饰技术制备高效、安全的变应原疫苗,将为过敏性疾病变应原疫苗研制与免疫治疗机理研究开拓一条新思路。
英文主题词house dust mite;mPEG;site-directed modification; immunotherapy;mechanism