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毛细管电泳检测肺癌基因突变的方法学研究
  • ISSN号:1004-4957
  • 期刊名称:分析测试学报
  • 时间:0
  • 页码:379-384
  • 语言:中文
  • 分类:O657.8[理学—分析化学;理学—化学] Q754[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]兰州军区兰州总医院临床药理基地,甘肃兰州730050, [2]兰州大学生命科学学院,甘肃兰州730000
  • 相关基金:国家自然科学基金面上资助项目(20775089)
  • 相关项目:高效毛细管电泳检测限制性内切酶酶切产物方法学研究
中文摘要:

建立了一种毛细管电泳快速高效检测聚合酶链反应(PCR)扩增产物以及限制性内切酶酶切产物的方法,使其更好地用于基因诊断。以聚环氧乙烷(poly(ethylene oxide),PEO)为筛分介质,用涂层的毛细管柱(37cm×75μm,有效长度27cm)分离pUC19 DNA/MspⅠ(HpaⅡ)Marker标准DNA片段。考察了筛分介质的质量浓度、pH值、毛细管柱的温度和运行电压。在1×TBE(pH8.2)电泳液、电压15kV、温度15℃,于10min内成功分离了Marker标准DNA片段。该方法快速、灵敏、准确,用于临床76例肺癌患者正常组织和肿瘤组织p53基因和ras基因点突变情况的检测,结果满意。

英文摘要:

A rapid and high efficiency capillary electrophoresis method was developed for detecting the products of polymerase chain reaction (PCR) amplification and restriction enzyme digestion to preferably use for gene diagnosis. The pUC19 DNA/Msp Ⅰ ( Hpa U ) Marker standard DNA fragments were separated on a fused silica capillary column (37 cm × 75 μm, the effective length 27 cm) using poly( ethylene oxide) (PEO) as sieving matrix. The influencing factors, including the concentration of buffer, pH value, the cartridge temperature and the applied potential were investigated. The best separation efficiency of the Marker standard DNA fragments was achieved in 10 min under using a running buffer of 1 × TBE(pH 8.2), applied voltage of 15 kV and temperature of 15 ℃. The pro- posed method was rapid, accurate and convenient, and was successfully applied in the detection of the p53 and ras gene mutation of normal tissues and lung cancer tissues in 76 lung cancer patients.

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期刊信息
  • 《分析测试学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:广东省科学技术厅
  • 主办单位:中国分析测试协会 中国广州分析测试中心
  • 主编:陈小明
  • 地址:广州市先烈中路100号34栋B201中国广州分析测试中心内
  • 邮编:510070
  • 邮箱:fxcsxb@china.com
  • 电话:020- 37656606
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-4957
  • 国内统一刊号:ISSN:44-1318/TH
  • 邮发代号:46-104
  • 获奖情况:
  • 获广东省第一、二届优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:25362