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脱氧核糖核酸-蛋白质相互作用产物的检测及其在胃癌组织中的应用
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:O657.1[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]西北师范大学化学化工学院,兰州730070, [2]西北师范大学生命科学学院,兰州730070, [3]兰州军区兰州总医院全军临床药理基地,兰州730050
  • 相关基金:国家自然科学基金(Nos.20775089 30970312)资助项目
中文摘要:

建立了无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光(Non-gel sieving capillary electrophoresis with laser inducedfluorescence,NGS-CE-LIF)检测脱氧核糖核酸(DNA)-蛋白质相互作用产物的方法。考察了筛分介质聚环氧乙烷(Poly(ethylene oxide),PEO)浓度、分离温度、分离电压及缓冲液三羟甲基氨基甲烷硼酸(Tris-Borate-ED-TA,TBE)pH值等条件对pUC19 DNA/MspⅠ(HpaⅡ)DNA Marker和Protein Molecular Weight Marker(Broad)D532S相互作用产物的影响。结果表明,当PEO浓度为0.1%,TBE的pH为9.0,分离电压为15 kV,分离柱温15℃时,DNA-蛋白质相互作用产物得到有效分离。本方法应用于人胃癌组织p53基因扩增后的PCR产物和从相应组织中提取的蛋白质二者相互作用产物时,检测效率高,分离效果好。

英文摘要:

A method was established to separate DNA-protein interaction products by non-gel sieving capillary electrophoresis with laser induced fluorescence(NGS-CE-LIF).A series of effects on CE were studied,namely sieving medium concentration,separation temperature,separation voltage,pH value of Tris-Borate-EDTA(TBE) buffer.The results indicated that pUC19 DNA/MspⅠ(HpaⅡ) DNA marker and protein molecular weight marker(Broad) D532S interaction products were effectively separated when sieving medium was 0.1%(w/V) poly(ethylene oxide)(300000),electrophoresis buffer was 1×TBE(pH9.0),separation voltage was 15 kV,and temperature was 15 ℃.The detection method of DNA-protein interaction products was used to analyze the interaction of the products of PCR of p53 gene and protein complex from gastric cancer tissue.The method has high detection rate and good separation efficiency.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455