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肺癌组织蛋白质混合物检测方法学研究
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:Chinese J. Anal. Chem.(分析化学)
  • 时间:0
  • 页码:1287-1292
  • 语言:中文
  • 分类:O641.3[理学—物理化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]兰州军区兰州总医院全军临床药理基地,兰州730050, [2]兰州大学生命科学学院,兰州730000
  • 相关基金:国家自然科学基金(Nos20775089 30970312)资助项目
  • 相关项目:高效毛细管电泳检测限制性内切酶酶切产物方法学研究
中文摘要:

采用无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光法(NGS-CE-LIF)检测蛋白质,考察了分离条件对分离的影响,并对提取的肺癌组织蛋白质混合物进行分析,与毛细管电泳紫外检测(CE-UV)及常规蛋白质检测手段聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行比较。异硫氰酸酯(FITC)衍生蛋白质,筛分介质为0.05%(w/V)聚环氧乙烷(PEO,Mr=300000),以TBE缓冲液(pH10.0)为电极缓冲液,分离电压为15kV,柱温15℃,氩离子激光器(λex=488nm,λem=520nm)检测。在此条件下可对6.5~200kDa范围的蛋白质进行分离,分离效果较好,15min内完成分离,理论塔板数(N)均值为9.12×104/m,检出限为0.28mg/L。结果表明,本方法具有筛分介质浓度调节简便,分离效果好,时间短等优点,具有一定的实际应用价值;对提取肺癌组织蛋白质混合物进行检测,检测效率和效果优于CE-UV及PAGE。

英文摘要:

An experimental method of protein detection by non-gel sieving capillary electrophoresis with laser induced fluorescence(NGS-CE-LIF) was established and improved.The method was applied to the analysis of protein complex of lung cancer and compared to capillary electrophoresis with UV detection(CE-UV) and polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE).The protein was derived by fluorescein isothiocyanate.The optimized conditions such as 0.05%(w/V) poly(ethylene oxide)(300000) as sieving medium,laboratory buffer TBE(pH 10.0) as electrophoresis buffer,separation voltage of 15 kV,temperature of 15 ℃ and argon ion laser(λex=488 nm,λem=520 nm) as detector were employed.Under the conditions,the proteins under the range of 6.5-200 kDa were completely separated in 15 min with good separation efficiency.The average theoretical plate number(N) is 9.12×104 /m,the detection limit is 2.8×10-4 g/L.The results showed that the improved method has the advantages of good separation efficiency,short separation time and the concentration of sieving medium was easy to adjust.The detection rate and efficiency of the method for the protein complex detection of lung cancer are better than those of CE-UV and PAGE.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455