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髓样相关蛋白14真核表达载体的构建及其细胞内定位研究
  • ISSN号：1672-8521
  • 期刊名称：感染.炎症.修复
  • 时间：0
  • 页码：206-209
  • 语言：中文
  • 分类：R[医药卫生]
  • 作者机构：[1]南方医科大学病理生理学教研室广东省蛋白质组学重点实验室
  • 相关基金：国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(2002CB513005);; 长江学者和创新团队发展计划(IRT0731);; 国家自然科学基金委员会-广东省人民政府自然科学联合基金重点项目(U0632004);; 国家自然科学基金项目(30670828);; 广东省科技计划项目(A1090202)
  • 相关项目：内毒素休克小鼠HMGB1启动子结合蛋白的鉴定及其功能研究
作者： 邓鹏|姜勇|王娟|徐佳|刘铮|伍丽琼|
关键词： 髓样相关蛋白14, 血凝素, 细胞内定位, 载体构建, Myeloid-related protein-14, Hemagglutinin, Intracellular localization, Vector construction
中文摘要：

目的:构建小鼠髓样相关蛋白14(MRP14)的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况。方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到MRP14编码序列。然后将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后转染NIH3T3细胞,在荧光显微镜下观察结果。结果:重组质粒经聚合酶链反应(PCR)、酶切和测序鉴定证明构建正确。转染实验发现,该质粒能够在NIH3T3细胞中表达,表达产物主要定位在细胞质中。结论:成功构建带HA标签的MRP14真核表达载体。该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为下一步深入研究MRP14作用细胞的信号通路提供了一个重要工具。

英文摘要：

Objective:To construct eukaryotic expression vector of myeloid-related protein-14(MRP14)for the detection of the expression and localization in NIH3T3 cells.Methods:Total RNA from the liver of BALB/c mice was extracted using a routine method.The coding sequence of mouse MRP14 (GenBank accession No. NM_009114.2)was amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)and cloned into he- magglutinin(HA)-tagged mammalian cell expression vector pcDNA3-HA,and it was followed by transfection in NIH...

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期刊信息
  • 《感染．炎症．修复》
  • 主管单位:解放军总医院
  • 主办单位:解放总医院第一附属医院
  • 主编：
  • 地址：北京市海淀区阜成路51号解放军304医院
  • 邮编：100048
  • 邮箱：gryzxf@vip.sina.com
  • 电话：010-66867399
  • 国际标准刊号：ISSN：1672-8521
  • 国内统一刊号：ISSN：11-5225/R
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  • 国内外数据库收录:
  • 被引量:1692