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2型猪链球菌SSU0448基因敲除突变株的构建及其毒力分析
  • ISSN号:0253-2654
  • 期刊名称:微生物学通报
  • 时间:2015.3
  • 页码:1717-1726
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]南京师范大学生命科学学院,江苏南京210046, [2]南京军区军事医学研究所,江苏南京210002
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.81471920,31170124,81172794);江苏省自然科学青年基金项目(No.BK20140096);南京军区军事医学科技创新课题(No.ZX39)
  • 相关项目:荚膜唾液酸对2型猪链球菌-宿主细胞相互作用的影响及其分子机制研究
中文摘要:

【目的】通过构建2型猪链球菌(SS2)强毒株05ZYH33的SSU0448基因缺失突变株Δ0448和互补株CΔ0448,探索SSU0448基因缺失对细菌基本生物学特性和细菌毒力的影响。【方法】用同源重组基因敲除方法构建筛选强毒株05ZYH33中N-乙酰半乳糖胺和半乳糖胺代谢途径相关转录调节因子SSU0448基因的缺失突变株,比较分析突变株Δ0448与野生株05ZYH33、互补株CΔ0448的基本生物学特性,小鼠毒力实验分析SSU0448基因缺失对细菌毒力的影响。【结果】PCR检测分析显示,SSU0448基因在转化重组体中被壮观霉素抗性基因所替代,表明基因敲除突变株构建成功;同时构建了基因功能互补株CΔ0448。生物学特性实验表明突变株Δ0448在成链能力上较野生株明显减弱,对数生长期稍短,快速到达平台期;而菌落形态、革兰氏染色和溶血活性方面无明显差异;小鼠毒力实验发现,突变株毒力并无显著改变。【结论】SSU0448基因的敲除能够改变2型猪链球菌的成链能力;不影响其侵袭致病能力,可能延缓2型猪链球菌的发病过程,此研究为2型猪链球菌致病感染奠定了基础。

英文摘要:

[Objective] Gene knockout mutant A0448 and the functional complementary strain CA0448 were constructed to investigate the role of SSU0448 gene on Streptococcus suis serotype 2 (SS2) morphology and virulence. [Methods] Based on the principle of homologous recombination, the SSU0448 gene was knocked out in SS2 virulent strain 05ZYH33. PCR analysis was carried out to identify the mutant, then screened the functional complementary strain CA0448 containing the SSU0448 gene expressing plasmid. The morphology and virulence of the established strains were examined. [Results] PCR analysis and DNA sequencing identified the knockout mutant A0448 and the SSU0448 gene was completely replaced by the spcr cassette. The functional complementary strain CA0448 was also successfully constructed. Gram staining showed that the mutant A0448 grew much shorter than the wild type 05ZYH33 and faster to reach the plateau phase. Deletion of the SSU0448 gene did not change the virulence of SS2 in mice infection assays. [Conclusion] Knockout of SSU0448 gene obviously influenced the chain ability of Streptococcus suis serotype 2, and its deficiency has no significant effect on the virulence in the mice model while it may delay the pathogenesis.

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期刊信息
  • 《微生物学通报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国微生物学会
  • 主编:赫荣乔
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路一号院3号中国科学院微生物研究所内B401室
  • 邮编:100101
  • 邮箱:xuj@sun.im.ac.cn
  • 电话:010-64807511
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-2654
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1996/Q
  • 邮发代号:2-817
  • 获奖情况:
  • 1992年中国科学技术协会优秀学术期刊三等奖,1992年国家科委中共中央宣传部新闻出版署“全国优...,2000年中国科学院优秀期刊三等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:29487