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重排NAD~+合成途径提高磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性
  • ISSN号：1671-4628
  • 期刊名称：《北京化工大学学报：自然科学版》
  • 时间：0
  • 分类：Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构：北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室
  • 相关基金：国家自然科学基金(21076013/21276014);国家“973”计划(2012CB725200)
作者： 润顺琪, 李会玉, 田平芳
关键词： 大肠杆菌, NAD+, 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶, 琥珀酸, 富马酸
中文摘要：

为提高磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的催化活性,构建了两个载体分别表达:(1)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC);(2)与NAD+合成相关的关键酶,包括烟酸转磷酸核糖激酶(pnc B)、烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶(nad D)和NAD+合成酶(nad E)。将这两个载体共转化大肠杆菌,获得重组菌E.coli(p ET-pepc&p; UC-pnc B-nad D-nad E)。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示这些酶均实现了高表达。摇瓶发酵显示,与单独过表达PEPC的重组菌相比,双质粒工程菌的PEPC酶活提高了4.36倍;与野生型大肠杆菌相比,双质粒工程菌的琥珀酸产量提高了4.23倍,达到0.9 g/L,富马酸产量提高了5.23倍,达到5.4 mg/L。上述结果表明加强NAD+合成途径提高了PEPC活性,并增加了还原三羧酸循环的代谢流量。

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期刊信息
  • 《北京化工大学学报：自然科学版》
  • 北大核心期刊（2011版）
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:北京化工大学
  • 主编：刘振宇
  • 地址：北京市北三环东路15号
  • 邮编：100029
  • 邮箱：bhxbzr@126.com
  • 电话：010-64434926
  • 国际标准刊号：ISSN：1671-4628
  • 国内统一刊号：ISSN：11-4755/TQ
  • 邮发代号:82-657
  • 获奖情况:
  • 1999年教育部优秀科技期刊二等奖,1997年第二届全国科技期刊评比三等奖,1995年全国重点高校自然科学学报二等奖,中国期刊方阵“双效”期刊,首届高校优秀科技期刊,全国石化行业优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘（网络版）,荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊（2004版）,中国北大核心期刊（2008版）,中国北大核心期刊（2011版）,中国北大核心期刊（2014版）
  • 被引量:9420