位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
大豆GmERF6基因的原核表达及重组蛋白纯化
  • ISSN号:1000-9841
  • 期刊名称:《大豆科学》
  • 时间:0
  • 分类:S565.1[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]吉林大学植物科学学院,吉林长春130062
  • 相关基金:转基因生物新品种培育重大专项资助项目(2008ZX08004-003); 国家自然科学基金面上资助项目(30971808); 吉林省科技发展计划重点资助项目(20080204); 长春市科技局国际科技合作资助项目(08GH 10); “211工程”三期重点学科建设资助项目
中文摘要:

将大豆中已克隆的一个新的ERF转录因子基因(GmERF6)构建到原核表达载体pET28上,导入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,对其进行IPTG诱导。结果表明:在IPTG浓度为0.3 mol.L-1,诱导时间为3 h时,重组蛋白得到表达,分子量大约为30 kDa。SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在。用8 mol.L-1尿素对其进行溶解后经Ni柱纯化,得到较好的纯化效果,Bradford法测定其蛋白浓度为0.56 mg.mL-1。

英文摘要:

Ethylene-responsive factors(ERFs)belong to a large family of transcription factors that are specific to plants,ERFs are extensively involved in the responses to biotic and abiotic stresses.A new ERF transcription factor-GmERF6 in soybean was subcloned into prokaryotic expression vector pET28 to get the expression protein for further study.The constructed vector pET28-GmERF6 was transformed into Rosetta(DE3)to get the recombinant protein by IPTG induction.The result indicated that an 30 kDa recombinant protein was expressed when the concentration and induction time of IPTG were 0.3 mmol·L-1and 3 h,respectively,the recombinant protein was mainly existed in inclusion body form through SDS-PAGE analysis.After the inclusion body was dissolved with 8 mol·L-1 urea,the high quality recombinant protein was obtained through Ni column purification and its concentration was 0.56 mg·mL-1 after determined by Bradford method.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《大豆科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:黑龙江农业科学院
  • 主办单位:黑龙江省农业科学院编辑出版中心
  • 主编:刘忠堂
  • 地址:哈尔滨市南岗区学府路368号
  • 邮编:150086
  • 邮箱:dadoukx@sina.com
  • 电话:0451-86668735
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-9841
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1227/S
  • 邮发代号:14-95
  • 获奖情况:
  • 1988年获黑龙江优秀期刊奖,1996年获黑龙江省科技情报二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:12334