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猴脑纹状体胆碱乙酰转移酶cDNA克隆及测序
  • ISSN号:0258-4646
  • 期刊名称:中国医科大学学报
  • 时间:0
  • 页码:3448-3452
  • 语言:中文
  • 分类:R338.2[医药卫生—人体生理学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中国医科大学基础医学院机能实验中心,辽宁沈阳110001, [2]中国医科大学基础医学院神经生物学教研室,辽宁沈阳110001, [3]中国医科大学公共卫生学院卫生检验学教研室,辽宁沈阳110001, [4]中国医科大学附属盛京医院神经外科,辽宁沈阳110001
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30570650,30670723)
  • 相关项目:白喉毒素受体介导大分子药物通过血肿瘤屏障效果和机制的研究
中文摘要:

目的:克隆猴胆碱乙酰转移酶(ChAT)cDNA,并将猴ChAT cDNA测序结果与猪、大鼠、小鼠、原鸡以及人的ChAT cDNA序列相比较。方法:以改良的酸苯酚方法提取成年日本猴脑纹状体总RNA。以RNA为模板经逆转录获得cDNA第一链,设计基因特异性引物扩增cDNA链上不同片段。经序列分析仪获取ChAT cDNA完整序列。结果:在猪、大鼠、小鼠、原鸡中作为起始密码的ATG密码子的位置在猴ChAT cDNA中由ACA所取代,而猪、大鼠、小鼠、原鸡及人类cDNA中终止密码子TGA的位置在猴ChAT cDNA中则由TAA取代。猴ChAT序列与人类、猪、小鼠、大鼠以及原鸡ChAT序列的相似程度分别为96.36%,87.96%,85.47%,84.88%和71.84%。氨基酸序列显示,ChAT中乙酰辅酶A结合区域和两个可能的钙/钙调蛋白激酶的磷酸化位点在猴ChAT中未发生改变。结论:猴ChAT cDNA与人ChAT序列最相似,与重要功能基团作用相关的氨基酸序列在猴ChAT中具有保守性。

英文摘要:

Objective: To clone the cDNA of monkey choline acetyltransferas (CHAT) and compare the sequence of monkey ChAT cDNA with that of pig,rat,mouse,gallus and human. Methods: Total RNA from Striatum of adult Japanese macaque was abstracted with the modified acid phenol method. RNA was reversely transcribed using superscript RNase H-reverse transcriptase to obtain the first-strand of cDNA, which was amplified with gene-specific primer pairs for different part of CHAT. All of the final polymerase chain reaction (PCR) products of different sizes were sequenced using the ABI 310 sequencer (Perkin Elmer,CA,USA) according to the manufacturer's instructions. Results: In monkey CHAT cDNA,the ATG codon assigned to the putative initiation codon for pig,rat,mouse and gallus was replaced by ACA and the TGA codon assigned to the termination codon for pig, rat, mouse, gallus and human was replaced by TAA. The percentage of similarity in the ChAT sequence between monkey and human,pig,mouse,rat,and gallus is 96.36%, 87.96%, 85.47%, 84.88% and 71.84% ,respectively. The amino acid sequence showed the acetyl CoA binding domain in ChATand two potential phosphorylation sites (Arg-Xaa-Xaa-Ser) of calcium/ calmodulin protein kinase were preserved in monkey ChAT cDNA. Conclusion: The monkey ChAT cDNA has the highest similarity to the human ChAT. The amino acid sequences related to the important functional groups were conserved in the cDNA of mokey ChAT.

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期刊信息
  • 《中国医科大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:辽宁省教育厅
  • 主办单位:中国医科大学
  • 主编:闻德亮
  • 地址:沈阳市沈北新区蒲河路77号
  • 邮编:110122
  • 邮箱:
  • 电话:024-31939622
  • 国际标准刊号:ISSN:0258-4646
  • 国内统一刊号:ISSN:21-1227/R
  • 邮发代号:8-175
  • 获奖情况:
  • 1997年中共中央宣传部第二届全国优秀科技期刊三等奖,1999年辽宁省教委辽宁省普通高等学校优秀自然科学...,1999年教充部全国自然科学学报优秀期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:19896