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重组风雨花凝集素在大肠杆菌中表达条件的优化
  • ISSN号:0490-6756
  • 期刊名称:《四川大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q81[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]四川大学生命科学学院,成都610064
  • 相关基金:国家自然科学基金(30670469;30970643)
中文摘要:

为提高重组表达质粒pET32c-ZGA在大肠杆菌中的表达量,对表达重组风雨花凝集素基因工程茵的培养条件进行优化筛选,对影响蛋白质表达量和工程茵生长的因素如pH值、诱导温度、IPTG、接种量、诱导时间、补充碳源形式、诱导时机、无机离子等进行了探索.经过优化,重组融合目的蛋白占茵体总蛋白的61.8%,比优化前提高了13.4%.条件优化后,pET32c-ZGA工程茵经过放大培养,获得6g/L的湿茵体量,超声波破碎茵体,SDS-PAGE证实重组融合蛋白以包涵体形式表达.

英文摘要:

In order to inerease the expression of recombinant Zephyranthes grandiflora Agglutinin (ZGA), the influences of culture conditions such as pH, temperature, inducting time, IPTG concentra- tion and carbon sources in growth medium, volume of medium, inoculum quantities, inoculum time and concentration of inorganic ions, i.e. Mgz+ , Ca2+ , NH+ et al on expression of recombinant protein were studied. The results after optimization showed that the expression of recombinant fusion ZGA was 61.8% of the total bacteria protein, increasing about 13.4%. The selected clone was amplified in 2 Liter LB culture medium and induced by IPTG, and 6 g/L thalli per liter culture medium were obtained under optimized conditions. The thalli was selected and homogenized under high pressure. SDSPAGE demonstrated that the recombinant targeted proteins were mainlv indwelled in the inclusion body.

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期刊信息
  • 《四川大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:国家教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 主编:刘应明
  • 地址:成都九眼桥望江路29号
  • 邮编:610064
  • 邮箱:
  • 电话:028-85410393 85412393
  • 国际标准刊号:ISSN:0490-6756
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1595/N
  • 邮发代号:62-127
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,四川省十佳科技期刊,教育部全国高校优秀学报二等奖(1995,1999),四川省科技优秀期刊一等奖(1996,2000)
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10542