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粉尘螨Derf18变应原的克隆表达、纯化及免疫学特性鉴定
  • ISSN号:1005-0507
  • 期刊名称:《寄生虫与医学昆虫学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学] O636.1[理学—高分子化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]深圳大学过敏反应与免疫学研究所,深圳518060
  • 相关基金:国家863计划项目(No.2002AA214011;2006AA02A231);国家自然科学基金项目(No.30471505;30271226);粤港关键领域重点突破项目(No.20054982207);广东省科技计划重大项目(No.2003C104019)
中文摘要:

通过对纯培养的粉尘螨提取总RNA,采用RT—PCR方法有效地扩增出Dern8片段,将Derf18连接到pET-24a表达载体上并转化到表达菌B121(DE3)中,得到重组质粒pET-Derf18和重组工程菌。重组工程菌经IPTG诱导培养,高效表达出Derf18蛋白,SDS—PAGE结果显示表达产物约为52kDa。表达产物经亲和层析纯化,用Westernblot方法检测免疫学活性,结果表明目的蛋白具有良好的免疫原性。

英文摘要:

In this study, the total RNA of live mites Dermatophagoidesfarinae were isolated and used for RT-PCR amplification of the Der f18 gene. The cloned Der f18 was ligated imo expression vector pET-24a and then transformed into E. coli BI21 (DE3) cells for expression. Expression of recombinant Der f18 protein was induced by adding IPTG to the growing E. coli BL21 (DE3) cells which contained the constructed plasmid. SDS-PAGE analysis showed that the mass weight of the recombinant Der f18 protein was about 52 kDa. IgE reactivity of recombinant Der f18 protein was investigated by immunoblot and the positive results indicate that the recombinant protein have good immunogenicity.

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期刊信息
  • 《寄生虫与医学昆虫学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:
  • 主办单位:军事医学科学院微生物流行病研究所 中国动物学会 中国昆虫学会
  • 主编:赵彤言
  • 地址:北京丰台东大街20号
  • 邮编:100071
  • 邮箱:jscyxkc@126.com
  • 电话:010-66948579
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-0507
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3158/R
  • 邮发代号:80-105
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:2452