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甘蓝型油菜基因BnRCH转染人HEK293A和Hela细胞的研究
  • ISSN号:0490-6756
  • 期刊名称:《四川大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065, [2]四川大学法医与基础医学院生物化学与分子生物学研究所,成都610065
  • 相关基金:国家自然科学基金(30971557, 30971816, 30871322)
中文摘要:

本研究从植物基因在动物细胞异源表达的角度入手,采用外源基因稳定转染的方法,向人胚胎肾细胞HEK 293A和人宫颈癌细胞Hela导入了BnRCH基因,获得了HEK 293A和Hela细胞的稳定转染子.使用RTPCR、qPCR和Western blot等方法鉴定了获得的稳定转染子,确认了稳定转染子的成功建立.本研究一方面说明BnRCH虽然为植物基因,却仍然能够在动物细胞中正常表达;另一方面也为开展对BnRCH基因在动物细胞中的功能研究和应用开发建立了平台.同时,使用免疫细胞化学法和绿色荧光蛋白质(GFP)示踪法分析了BnRCH蛋白质在Hela细胞中的定位,结果表明:BnRCH蛋白质在Hela细胞中均匀分布,实现了对BnRCH基因在Hela细胞中作用的初步探索.

英文摘要:

BnRCH gene was studied with heterologous expression system: it was stably transfected into human embryonic kidney cells 293A and human cervical carcinoma cells Hela. The stable transfectants were verified all right with RTPCR, qPCR and Western blotting methods, which not only demonstrated that the plant gene BnRCH can express in animal cells normally, but also established the platform for studying BnRCH gene in animal cells. Meanwhile, the immunological cell chemistry method and green fluorescence protein (GFP) tracking method were used to study the subcellular localization of BnRCH protein in Hela cells and both methods indicated that BnRCH protein was evenly distributed inside Hela cells, which realized the preliminary investigation of the functions of BnRCH gene in Hela cells.

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期刊信息
  • 《四川大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:国家教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 主编:刘应明
  • 地址:成都九眼桥望江路29号
  • 邮编:610064
  • 邮箱:
  • 电话:028-85410393 85412393
  • 国际标准刊号:ISSN:0490-6756
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1595/N
  • 邮发代号:62-127
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,四川省十佳科技期刊,教育部全国高校优秀学报二等奖(1995,1999),四川省科技优秀期刊一等奖(1996,2000)
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10542