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人脑心肌炎病毒免疫球蛋白M捕获酶联免疫吸附试验的建立及初步应用
  • ISSN号:1672-9455
  • 期刊名称:检验医学与临床
  • 时间:2015.8.14
  • 页码:2139-2141
  • 分类:R511[医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学]
  • 作者机构:[1]甘肃省动物细胞工程技术研究中心,兰州,730030, [2]西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,兰州730030
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31160033、31460665);教育部“长江学者和创新团队发展计划”项目(IRT13091).
  • 相关项目:脑心肌炎病毒流行病学调查及人畜传播机制的研究
中文摘要:

目的:建立脑心肌炎病毒(EMCV)免疫球蛋白 M (IgM )捕获酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,用于感染 EMCV 血清学早期诊断。方法用抗人 IgM (μ链)单抗进行包被,辣根过氧化物酶(HRP)标记的 EMCV为酶标抗原,初步建立 EMCV IgM 捕获 ELISA ;对建立的方法进行条件优化及特异性、精密性、稳定性等验证。结果建立的 EMCV IgM 捕获 ELISA 检测方法抗体包被浓度为1μg/mL ,EMCV‐HRP 工作浓度和反应时间分别为1∶400和45 min ,封闭液为10%马血清时该法检测效果可达最佳,3批试剂批内及批间变异系数均小于5%,且特异性、精密性及稳定性较好。结论建立的 EMCV IgM 捕获 ELISA 法特异、精密且稳定,可用于人感染 EMCV的早期检查,为 EMCV 的诊断奠定基础。

英文摘要:

Objective To establish the encephalomyocarditis virus(EMCV) immunoglobulin M (IgM ) captured enzyme‐linked immunosorbent assay (ELISA ) detection method for the application in early serological diagnosis of EMCV infection .Methods Anti‐human(μ chain) monoclonal antibody was used to conduct the coating and the horse radish peroxidase(HRP) labelled EMCV served as the enzyme labeled antigen ,the EMCV IgM capture ELISA meth‐od was preliminarily established ;The established method was performed the conditional optimization and verification of the specificity ,precision and stability .Results The antibody coating concentration in the established EMCV IgM captured ELISA method was 1 μg/mL ,the EMCV‐HRP work concentration and reaction times were 1 ∶ 400 and 45 min respectively .When the blocking solution was 10% horse serum ,this method achieved the best effect .The intra‐assay and inter‐assay coefficients of variation in 3 batches of reagents were less than 5% ,and the specificity ,precision and stability were better .Conclusion The established EMCV IgM capture ELISA method is specific ,precise and sta‐ble ,can be used for the detection of early human EMCV infection and lays the foundation for the EMCV diagnosis .

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期刊信息
  • 《检验医学与临床》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:重庆市卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:重庆市卫生信息中心 重庆市临床检验中心
  • 主编:吴开明
  • 地址:重庆市渝北区宝环路420号
  • 邮编:400014
  • 邮箱:cqwsxx@163.com
  • 电话:023-63613484
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-9455
  • 国内统一刊号:ISSN:50-1167/R
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 全国医学期刊协作网优秀期刊,重庆市一级期刊,中国科技论文在线优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊
  • 被引量:42029