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一种提取富含油脂植物组织总RNA的改良SDS酸酚法
  • ISSN号:1006-687X
  • 期刊名称:《应用与环境生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q949.753.506[生物学—植物学]
  • 作者机构:[1]四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.30670204)、科技部国际合作项目(No.2006DFB63400)、教育部博士点基金项目(No.20060610015)和国家“十一五”科技支撑项目(No.2006BAD07A04)资助.
中文摘要:

采用常规的方法提取富含油脂的植物组织总RNA常难以取得满意的结果. 对林莎两次裂解法进行了改良,即将SDS的浓度降低至1%,所用酸酚的pH值降低至4.0,去掉提取液II处理步骤,获得的总RNA效果较好:得率高,RNA产量可达74.7 μg (100 mg)^-1;没有DNA污染,A260 nm/A280 nm值为2.026,A260 nm/A230 nm值为2.082,说明蛋白质及其它污染非常低,通过RT-PCR成功地扩增出了麻疯树curcin基因长为927 bp的特异条带. 相比林莎的方法,改良SDS酸酚法具有经济、简便、适用性广的特点. 图5 表1 参13

英文摘要:

The total RNA extraction from plant tissues richin lipid by conventional methods often cannot meet the requirement of downstream experiments. This problem was overcomed by modifying Lin's twice-extraction method: Adjusting the concentration of SDS and pH value of phenol to 1% and 4.0 respectively, and removing the solution II treatment. The yield was high and reached 74.7 μg (100 mg)^-1 (fresh weight). There was no genomic DNA contamination in the process. The value of A260 nm/A280 nm was 2.026 and that of A260 nm/A230 nm was 2.082, meaning that protein and other contaminations were low. A 927 bp fragment of Jatropha curcas' curcin gene was successfully amplified from the obtained total RNA. Compared to Lin's method, this improved SDS acid phenol method is economical, convenient and has a wide applicability. Fig 5, Tab 1, Ref 13

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期刊信息
  • 《应用与环境生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院成都生物研究所
  • 主编:吴宁
  • 地址:成都市人民南路4段9号
  • 邮编:610041
  • 邮箱:biojaeb@cib.ac.cn
  • 电话:028-82890917
  • 国际标准刊号:ISSN:1006-687X
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1482/Q
  • 邮发代号:62-15
  • 获奖情况:
  • 中国农业期刊金犁奖学术类一等奖(2006),* 中国期刊方阵双效期刊(2002年),* 四川省第二届优秀期刊(2000年),* 四川省一级学术期刊(1998年)
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:23016