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软骨藻酸作用蛋白质的亲和毛细管电泳筛选
  • ISSN号:1000-8713
  • 期刊名称:色谱
  • 时间:2015.7.8
  • 页码:673-677
  • 分类:O658[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]北京理工大学生命学院,北京100081, [2]国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心,福建厦门361000
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(21175011,21375008);国家“973”计划项目(2012CB910603);国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心开放基金( MBRCU201304).
  • 相关项目:蛋白质核酸适配体高效筛选的毛细管电泳方法学基础研究
中文摘要:

基于亲和毛细管电泳,定性比较了血浆、肠道及细胞线粒体中所选的9种重要功能蛋白质与神经毒性生物毒素———软骨藻酸( domoic acid,DA)的相互作用。以 DA淌度比变化量ΔM 与蛋白质浓度 L 作图,根据斜率值大小可比较 DA与蛋白质作用的相对强弱。结果如下:可与 DA相互作用的有6种蛋白质,作用强弱为:人凝血酶>细胞色素 C≈胰蛋白酶≈免疫球蛋白 E( Ig E)≈核糖核酸酶 A>λ核酸外切酶;而铁蛋白、转铁蛋白、凝集素与 DA未表现出相互作用和亲和力。实验表明,亲和毛细管电泳具有高效、快速、所需样品量低的优点,可用于DA作用靶蛋白的筛选,为 DA的毒性机制研究和毒性防护提供基础信息。

英文摘要:

Domoic acid( DA)is a biological neurotoxin that causes amnesic shellfish poison-ing. Study of the interactions between DA and important functional proteins contributes to understand the toxicity mechanism of DA to biological macromolecules. In this paper,the inter-actions between DA and nine important proteins in plasma,intestine and mitochondria were qualitatively compared by affinity capillary electrophoresis. Proteins were used as affinity lig-ands while DA as the affinity receptor. Proteins with the concentrations of 0,0. 2,0. 4,0. 6, 0. 8 μmol/L were added in the electrophoresis buffer and the migration times of 0. 2 mg/mL DA were detected. Then the linear graphs of the variation of DA mobility ratio(ΔM)with the pro-tein mass concentration( L)were drawn. According to the slope value,the relative strength of the interactions between DA and proteins was compared. The results showed that six proteins can interact with DA and the relative strength order was human thrombin〉cytochrome C≈tryp-sin≈immunoglobulin E( Ig E)≈ribonuclease A〉λ exonuclease,while ferritin,transferrin and lectin had no affinity with DA. With the advantages of high efficiency,fast analysis and less sample consumption,affinity capillary electrophoresis is a convenient method for screening DA target proteins,which will provide basic information for the toxic mechanism and defence of DA.

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期刊信息
  • 《色谱》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院大连化学物理研究所
  • 主编:张玉奎
  • 地址:大连市中山路457号
  • 邮编:116023
  • 邮箱:sepu@dicp.ac.cn
  • 电话:0411-84379021
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8713
  • 国内统一刊号:ISSN:21-1185/O6
  • 邮发代号:8-43
  • 获奖情况:
  • 1998年获中国科学院科学出版基金择优支持(1998-2...,2001年获第四届中国科学院优秀期刊二等奖,2002年获第三届中国科协优秀期刊三等奖,连续多年被评为辽宁省一级期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:26730