位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
毛细管电泳法表征多肽及糖蛋白的稳定性
  • ISSN号:1000-8713
  • 期刊名称:色谱
  • 时间:2013
  • 页码:543-549
  • 分类:O658[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]北京理工大学生命学院,北京100081, [2]北京市理化分析测试中心,北京100089
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(21175011,20875009);科技部基础研究计划项目(2012CB910603)
  • 相关项目:蛋白质核酸适配体高效筛选的毛细管电泳方法学基础研究
中文摘要:

建立了毛细管电泳表征多肽和糖蛋白稳定性的方法。分别以血管紧张素II(Ang II)和植物血球凝集素(PHA)、牛凝血酶(B-Thr)、人凝血酶(H-Thr)、辣根过氧化物酶(HRP)4种糖蛋白为多肽和糖蛋白的模式分子。从样品浓度、电泳缓冲液、样品溶液pH和离子强度等方面优化了血管紧张素II的分离分析条件;从毛细管的选择、样品的电荷状态、电泳缓冲液的选择和分离电压的影响等方面讨论了糖蛋白的分离条件。Ang II和4种糖蛋白的稳定性试验结果表明:Ang II可在pH 7.4的硼酸盐缓冲液(0.02 mol/L)中于4℃下稳定放置48 h;4种糖蛋白可在pH 7.4硼酸盐缓冲液(0.2 mol/L)中于20,4,-20℃下稳定放置48 h;放置时间大于一周且小于四周时,在-20℃下各蛋白质均保持稳定;放置时间大于两周且小于四周时,只有HRP在上述3个温度下均保持稳定。该方法具有高效、快速、简单、低成本的特点,可广泛应用于多肽和蛋白质的稳定性表征。

英文摘要:

A capillary electrophoresis(CE) method was developed for the stability characterization of polypeptides and glycoproteins.Angiotensin II(Ang II),phytagglutinin(PHA),bovine thrombin(B-Thr),human thrombin(H-Thr) and horseradish peroxidase(HRP) were used as polypeptide and glycoprotein mode molecules.The parameters affecting the analysis efficiency for Ang II,such as sample concentration,running buffer,pH and ionic strength of sample solution were optimized,as for the glycoprotein,capillary conditions,charge state of sample,running buffer and applied voltage were optimized.It showed that the Ang II was stable when kept in borate buffer(0.02 mol/L pH 7.4) at 4 ℃ for 48 h.The four glycoproteins were quite stable in borate buffer(0.2 mol/L pH 7.4) at 20,4,-20 ℃ for 48 h,and also kept stable at-20 ℃ when deposited over one week and less than four weeks.HRP was the only one that kept stable when deposited over two weeks and less than four weeks.This method is effective,rapid,simple and low-cost and can be widely used for the stability characterization of polypeptides and glycoproteins.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《色谱》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院大连化学物理研究所
  • 主编:张玉奎
  • 地址:大连市中山路457号
  • 邮编:116023
  • 邮箱:sepu@dicp.ac.cn
  • 电话:0411-84379021
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8713
  • 国内统一刊号:ISSN:21-1185/O6
  • 邮发代号:8-43
  • 获奖情况:
  • 1998年获中国科学院科学出版基金择优支持(1998-2...,2001年获第四届中国科学院优秀期刊二等奖,2002年获第三届中国科协优秀期刊三等奖,连续多年被评为辽宁省一级期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:26730