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毛细管电泳激光诱导荧光法优化量子点-转铁蛋白偶联体系及用于细胞标记
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:分析化学
  • 时间:2013
  • 页码:725-731
  • 分类:TQ314.24[化学工程—高聚物工业]
  • 作者机构:[1]北京理工大学生命学院,北京100081, [2]北京理工大学生命学院,北京100081, 北京市理化分析测试中心北京100089
  • 相关基金:本文系国家自然科学基金(Nos.21175011,20875009),国家重点基础研究发展计划(No.2012CB0603)资助
  • 相关项目:蛋白质核酸适配体高效筛选的毛细管电泳方法学基础研究
中文摘要:

利用毛细管电泳激光诱导荧光(CE-LIF)表征了偶联剂N-羟基硫代琥珀酰亚胺(NHS)及NHS和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)混合偶联剂对CdTe量子点活化效果的差异,优化了CdTe与转铁蛋白(Trf)的偶联条件,比较了CdTe-Trf,CdTe-BSA偶联物及CdTe量子点对Hela细胞的标记效果.结果表明:NHS活化后的量子点性能优于混合偶联剂EDC-NHS.31.2 μmol/LTrf与CdTe形成的偶联物CdTe-Trf对Hela细胞的标记效果最佳.CdTe-Trf在4℃孵育20 min可快速标记在Hela细胞的表面;在37℃孵育7h后,可进入Hela细胞内.说明所制得的CdTe-Trf偶联物具有Trf的生物功能,它可通过特异性识别并结合细胞膜表面的Trf受体而转入Hela细胞.而CdTe-BSA偶联物的标记不具特异性,CdTe则不能用于Hela细胞的标记.

英文摘要:

Capillary electrophoresis-laser inductive fluorescence (CE-LIF) was used to characterize the active effect difference of coupling agent N-hydroxysulfo-succinimide (NHS) and the mixture of NHS and 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimides hydrochloride (EDC) on quantum dot CdTe, and to opti- mize the coupling conditions of CdTe and transferrin (Trf). The labeling effect of CdTe-Trf and CdTe-BSA complex as well as free CdTe for Hela cell were compared. Results demonstrated that the property of CdTe activated by NHS was better than the mixture of EDC-NHS. When 12.5, 31.2 and 40.6 p.mol/L Trf were used to couple CdTe respectively, the resultant of CdTe with 31.2 p~mol/L Trf optimized by CE-LIF showed the best labeling on Hela. The CdTe-Trf resultant labeled Hela rapidly on surface when they incubated at 4 ~C for 20 min, and transferred into Hela when they incubated at 37℃ for 7 h, which manifested the CdTe-Trf resultant had biological function. The CdTe-Trf can recognize and bind the Trf receptor on cell membrane specifically and enter Hela, while CdTe-BSA can not recognize Hela specifically and free CdTe can not label on cell.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455