噬菌体基因组编码产生某些特殊的蛋白分子,可与宿主菌生长、代谢的重要调控性蛋白结合,并使其钝化,从而阻断宿主的生长与繁殖,将宿主菌大分子合成机制和能量装置转向噬菌体自身的复制与增值。因此噬菌体这种操纵宿主菌关键性代谢途径的独特的作用机制可作为发现抗菌药物作用靶点的新策略。本课题从铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组中鉴定2个出对宿主菌的生长、DNA、RNA及蛋白质合成具有抑制作用的噬菌体基因(ORF21与ORF48);构建铜绿假单胞菌基因组文库, 构建诱饵质粒pRBR-21与pRBR-48,分别与基因组文库共转化KS1菌株,利用细菌双杂交技术筛选出9个可与噬菌体蛋白相互作用的铜绿假单胞菌蛋白,它们的编码基因均为必需基因,其中有2个基因的编码蛋白为"conserved hypothetical protein",其功能有待进一步研究,可望深入阐明噬菌体对宿主菌的抑制作用并发现新的抗菌靶点。另外,克隆、表达了噬菌体内溶素基因,亲和层析纯化该重组蛋白,并进行了初步的功能活性检测,发现该蛋白可降解铜绿假单胞菌肽聚糖,并且对金黄色葡萄球菌有一定的抑菌作用,表明该内溶素基因产物具有潜在的抗铜绿假单胞菌的
英文主题词Pseudomonas aeruginosa;phage genome;drug target;protein-proteininteraction;endolysin