本课题在先前研究发现白藜三醇能抑制血管平滑肌细胞增殖和血管内膜增生并获得一种新的白藜三醇结合蛋白(RTP)的基础上,进一步探讨RTP与血管平滑肌细胞增殖的关系;研究采用基因工程技术获得重组RTP,分离、纯化并制备RTP单克隆抗体;应用体外细胞培养和动脉粥样硬化再狭窄模型,采用分子生物学技术检测培养的血管平滑肌细胞和动脉粥样硬化再狭窄血管壁RTP的mRNA、蛋白表达水平,并观察白藜三醇对RTP mRNA和蛋白表达水平的影响;在此基础上进一步研究RTP过表达及RTP低表达对血管平滑肌增殖的调控作用。本课题的研究将阐明白藜三醇直接通过与RTP的特异性结合抑制平滑肌细胞的增殖和血管内膜的增生;揭示RTP调控平滑肌细胞增殖的分子机制。研究结果将为今后白藜三醇作为冠心病血管再狭窄新的靶向治疗提供理论和实验依据。
白藜三醇是一种具有心脏保护作用的多酚类化合物,可以抑制血管平滑肌细胞的增生。近年来,有研究报道利用白藜三醇亲和层析柱可以从细胞胞浆蛋白中纯化出白藜三醇结合蛋白(resveratrol-targeting protein, RTP)。本课题旨在探讨白藜三醇结合蛋白与血管平滑肌细胞增生的关系。课题主要内容包括分离、纯化RTP;采用分子生物学技术研究白藜三醇对培养的血管平滑肌细胞和动脉粥样硬化再狭窄模型血管壁RTP的mRNA和蛋白表达水平的影响;通过RTP基因高表达和低表达的方法直接证明RTP对血管平滑肌细胞增殖调控的分子机制。课题的主要结果有血管平滑肌细胞存在RTP;白藜三醇抑制培养的血管平滑肌细胞和动脉粥样硬化再狭窄模型血管壁RTP的mRNA和蛋白表达,RTP基因高表达的血管平滑肌细胞增殖能力增强,而RTP基因低表达的血管平滑肌细胞增殖能力受抑制。课题的意义在于阐明白藜三醇通过调控RTP的表达产生抑制血管平滑肌增殖和血管内膜增生的作用,为今后白藜三醇作为冠心病血管再狭窄的新的靶向治疗提供理论和实验依据。