分别在实验酵母、工业酒精酵母的细胞内,胞外和细胞表面表达了来源于扣囊复膜孢酵母的β-葡萄糖苷酶BGL1基因,并对所得的重组菌SBA1(PPGK1-BGL1),SBB1(PPGK1-αF-BGL1),SBC2(PPGK1-αF-BGL1-AG1)进行了有氧条件下的纤维二糖发酵实验,初步说明工业酒精酵母不具有转运纤维二糖的能力;以实验酵母、工业酒精酵母及对应的在胞内表达纤维二糖酶的重组酵母为研究对象,通过基因敲除研究了麦芽糖转运系统在酿酒酵母纤维二糖转运中可能起的作用,未能获得明确的转运纤维二糖能力的数据。进一步构建了同时表达纤维二糖透过性酶和β-葡萄糖苷酶的重组菌BPS3(PPGK1-BGL1-bglP),其具有较好的转运和利用纤维二糖的能力,在96 h内几乎耗尽10 g/L的纤维二糖并产生4.4 g/L的酒精。应用前期验证的Cre/loxp系统和rDNA位点同源重组,在工业酒精酵母中同时整合表达纤维二糖透过性酶和β-葡萄糖苷酶,赋予其利用纤维二糖的能力,重组菌不仅能够利用纤维二糖,且表现出较快的生长速率,耗糖速率。
英文主题词cellobiose; S. cerevisiae; transport; ethanol