粉虱传双生病毒(WTGs)是一类具有经济重要性植物病毒,前期研究表明WTGs在云南发生普遍,为害烟草、番茄、南瓜等多种作物。在云南WTGs分离物中检测到与致病性相关的DNAβ分子,且与国外与报道的DNAβ核酸序列同源性较低,来自不同地区分离物的DNAβ序列差异较大。本项研究拟应用DNAβ的保守引物通过PCR方法扩增并测定云南不同区域中寄主植物及不同症状来源的DNAβ的类型、分布,并分析云南WTGs所含DNAβ基因组结构的变异,应用农杆菌介导的方法构建各DNAβ主要类型的侵染性克隆,研究其致病性变异,分析DNAβ与云南WTGs发生流行的相互关系,为该类病毒的监控提供依据,并在WTGs DNAβ致病性变异方面获得新的发现,在国内外发表相关研究论文5- - 6篇。
系统采集了云南粉虱传双生病毒(WTGs)疑似病样364份,应用WTGs外壳蛋白基因及基因间隔区约500bp的通用引物PA/PB进行PCR扩增,获得276个WTGs分离物,应用WTGs DNAβ通用引物beta01/beta02进行PCR扩增,在WTGs分离物中有145个含有WTGs致病相关卫星分子DNAβ。扩增到DNAβ片段经克隆和测序,测定了101个DNAβ分子的全基因组序列,对其中78个序列与同属WTGs分离物的DNAβ进行了比对分析,其中62个与中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)不同分离物的DNAβ同源性最高,10个与云南赛葵黄脉病毒(MYVYNV)不同分离物的DNAβ同源性最高。云南WTGs中DNAβ因地理环境差异表现出基因组结构差异的多样性,从中发现了一个以TYLCCNV元谋菜豆分离物DNAβ为代表的一个新的DNAβ簇群,研究分析了不同地区及不同寄主中WTGs DNAβ的遗传进化关系,对其致病性差异正进一步开展研究,研究中还发现2个WTGs新种,在国内外发表了相关研究论文8篇,其中SCI源刊物1篇,培养研究生3名,有1人晋升高级专业技术职称。