在完成细胞培养基底制备和表面处理的基础上,改进和建立了一套检测水凝胶弹性模量的方法,进一步项目研究了影响水凝胶力学性能的因素,并通过数学模拟找出影响因素与弹性模量之间的定量关系,从而实现了对水凝胶力学性能的定量控制。 参照肝纤维化临床分期设计基底膜的硬度,采用动态显微摄影技术比较分析了肝细胞(L02)在三种不同硬度(3.6 kPa、10 kPa、30 kPa)的基底上形态调整的响应。以此为基础,以免疫组织化学考查了不同硬度基底上肝细胞骨架构像改变,并应用图像处理技术定量评价了肝细胞在不同硬度基底上细胞间粘附分子(E-钙粘素)和细胞基底间粘附斑相关分子(桩蛋白)的荧光强度,研究发现硬度基底通过影响细胞骨架构象和钙粘素与整合素两大粘附系统的竞争关系,从而对细胞间连结方式和细胞表型维持产生影响。结合临床应用研究了基底硬度与细胞因子协同作用对肝细胞代谢行为的影响通过对肝细胞在不同硬度基底上整合素、E-钙粘素及白蛋白和alpha-平滑肌动蛋白表达的定量分析,表明TGF-β1对肝细胞向间充质表型转变的影响随基底硬度增加而增大。项目为肝纤维化发病机制研究建立了可行的体外培养模型和方法。
英文主题词Mechanical properties of substrate; Mechani-chemical cooperation; Hepatic cell; Phenotype transform