流感病毒具有易变异、易重组的特点,被认为是人类面临的最持久和最重要的威胁之一,历史上四次流感大流行均是由流感病毒的重配株或是变异株引起的。目前H5N1高致病性禽流感病毒以及最近新型的甲型H1N1流感病毒所导致的高病死率所引发的公共卫生问题更是引起了国际社会的高度重视,因此及时、准确的检测流感病毒已成为有效防控人禽流感疫情的前提。本项目选取H1N1、H3N2和B型三种常见季节性流感病毒以及H5N1、H9N2两种人感染禽流感病毒作为检测靶病毒。以血凝素基因、神经氨酸酶基因、核蛋白基因作为检测靶基因,设计和筛选亚型特异性探针和致病力鉴别探针。比较单引物扩增、随机引物扩增、体外转录三种RNA扩增方法的扩增效率,确定样品处理方法。在此基础上,确定此基因芯片检测体系的Cutoff值,并对此基因芯片的特异性、灵敏性、重复性及符合率等技术指标进行评价。项目所建立的流感病毒基因芯片检测技术能够特异性检测5种常见的流感病毒,并且该检测技术特异性强、敏感性高、重复性好,适应大规模、高通量和平行检测的要求,能够对致病力进行有效甄别,可作为临床诊断、传染病防控等方面的有益补充。
英文主题词DNA microarray;influenza virus;Human avian influenza virus;Detection;Virulence