本项目经过大量实验研究成功地建立了人肾小管上皮细胞(HK2细胞)中马兜铃酸类成分的HPLC分析方法和样品处理方法,进而又建立了HK2细胞核中该类成分的HPLC分析方法和样品处理方法。应用建立的方法对马兜铃酸类成分在肾小管上皮细胞中的分布与蓄积进行了研究。 结果显示AA和AL均可进入HK2细胞并可在细胞中蓄积,并发现和确认了在HK2细胞内该类成分质和量随时间的变化规律。应用荧光显微镜对AA进入HK-2细胞后细胞内产生的荧光物质进行了定性和定量研究。应用激光共聚焦显微镜对AL-I在细胞中的分布情况进行分析,准确定位了其在细胞内的分布。本研究还建立了HK-2细胞DNA样品的的制备及HPLC-FLD分析方法。本项目的研究成果为AAN肾毒性机制的研究和AA及AL类成分的毒性研究提供了科学的方法和依据。
英文主题词Aristolochic acids/ Aristololactams; HK-2 cells; HPLC; Inverted fluorescence microscope/ LSCM;distribution /accumulation