中文摘要：

本项目以四种生长状态（年轻、静息、复制性衰老和过早性衰老）的正常人胚肺纤维细胞为模型，利用定量蛋白质组学技术，以年轻和静息细胞为对照，鉴定了多个衰老相关蛋白（collagen type 1, CKAP4, PTRF, PP4等）。对其中两个蛋白质PTRF和PP4进行深入研究。研究结果表明（1）PTRF在衰老细胞中和在老龄小鼠组织中过表达；在年轻细胞中PTRF主要定位于细胞核而在衰老细胞中则定位于细胞膜。对PTRF蛋白四个磷酸化位点进行定点突变研究发现，在细胞衰老过程中，PTRF在细胞中的转位或定位受磷酸化调控，磷酸化修饰决定了PTRF在细胞中定位及其在Caveolae信号通路中的功能。过表达PTRF可诱导正常人成纤维细胞衰老，相反PTRF基因沉默可延长细胞衰老，进一步研究发现，PTRF通过Caveolae/p53/p21信号通路调控细胞衰老。（2）蛋白磷酸酶PP4及其调节亚基在细胞衰老过程中表达量降低。gH2AX是PP4底物，gH2AX通过募集DNA损伤修复蛋白，参与DNA损伤修复以及衰老相关异染色质的形成，是细胞衰老的分子标记物，PP4基因沉默促进gH2AX积累，诱导细胞衰老。