中文摘要：

t(14;18)染色体易位导致Bcl2基因异常表达和正常淋巴细胞抗凋亡能力上升，是人类白血病滤泡样淋巴瘤形成的重要起始步骤。80%以上Bcl2易位染色体的断裂点位于Bcl2基因3'端非翻译区内跨度约150bp的主要断裂区（mbr）。已知mbr为核基质附着区，是转录调节因子SATB1的结合位点。我们假设mbr为调节Bcl2基因活性的功能区, 破坏mbr可改变Bcl2基因的活性。为此，我们计划用基因敲除技术，敲除Nalm-6细胞中Bcl2基因上的mbr 序列，建立一个mbr缺失杂合型细胞模型，并在此基础上分析敲除mbr对Bcl2基因转录和DNA复制的影响及其生物学效应。同时用含有Bcl2 mbr 的报道质粒对不同细胞做体外瞬时转染，分析SATB1与mbr调节功能的关系。本项目从一全新的角度探讨Bcl2基因活性的调控机制，可为阐明滤泡样淋巴瘤形成的分子生物学机制提供重要的实验和理论依据。

结论摘要：

BCL2原癌基因位于18号染色体上，其基因产物BCL2是一个重要的抗凋亡蛋白，并参与细胞周期调控和细胞分化。BCL2基因过度表达与肿瘤的发生、发展及预后密切相关。但BCL2基因异常表达的机制依然不清楚。位于BCL2基因3'非翻译区的主要断裂点区（mbr）是t(14;18)染色体易位中18号染色体上的断裂热点，也是核基质附着蛋白及转录因子SATB1的结合位点。为了深入阐明BCL2基因表达调控的机制，我们构建了报告基因和mbr+/mbr-杂合子细胞系，并运用RNA和蛋白分析技术，对标书提出的"BCL2 mbr作为一个特定的核基质附着区，可通过与SATB1蛋白的相互作用调控BCL2基因的活性"的假设开展了深入研究，证实距BCL2基因启动子200kb 的 mbr是一个新的调控元件，可直接上调BCL2基因的转录，参与BCL2基因对凋亡刺激的反应，mbr的调控功能由SATB1介导。上述研究结果为阐明BCL2基因在肿瘤组织中的异常表达，论证细胞凋亡和肿瘤发生间的相互关系提供了重要的线索和独特的视角，为进一步的研究打下了坚实的基础，同时还为临床上发展更加特异和有效的治疗手段提供了重要理论依据。