中文摘要：

本项目研究了鳗李斯顿氏菌VI 型分泌系统(T6SS)在致病性和蛋白分泌中的功能。PCR分析显示，T6SS基因普遍存在于临床和环境鳗李斯顿氏菌株中；qRT-PCR研究显示，在体外培养检测不到致病性M3株T6SS及其分泌基质hcp的转录表达，但在感染鱼的内脏组织可检测到；6个T6SS基因及hcp缺失后，M3生长加快，运动力、菌膜形成力下降，对鱼的毒力减弱；免疫共沉淀实验表明T6SS的外膜蛋白LAN113分别与两个穿膜蛋白LAN115和LAN120相互作用；ATCC43007株的2个穿膜蛋白缺失后，检测不到Hcp的分泌。结果表明T6SS在鳗李斯顿氏菌的致病性和蛋白分泌中发挥作用。进一步研究显示，RpoN缺失后，M3生长加快，运动力、菌膜形成力下降，多个毒力相关基因转录表达下降；qRT-PCR结果显示RpoN与LAN117（依赖sigma 54的激活子）正调T6SS的转录表达，T6SS正调基质蛋白基因（hcp, vgrG）和蛋白酶基因(empA, prtV) 的转录表达，RpoN与RpoS相互调控，表明RpoN、T6SS、RpoS存在调控网络。Hcp能刺激鱼产生特异性抗体，是有效的抗原蛋白。