本项目是在前期工作基础上,鉴定了人PI3Kγ基因中存在的内含子型MAR共存的组织特异性增强子,对其在细胞髓系分化中转录活化PI3Kγ基因表达的机制进行了研究。通过报告基因和细胞瞬时转染,对增强子的活性和特异性进行了验证。定点突变增强子上的转录因子结合位点,结合细胞共转染,筛选了影响增强子活性的关键性转录因子(包括PU.1与GATA2)。建立PU.1促K-562细胞髓系分化的模型,利用蛋白质-DNA结合技术,探索了PU.1和GATA-2通过与上述增强子的作用,参与细胞髓系分化过程中PI3Kγ基因转录活化的机制。本研究有助于阐明免疫功能基因PI3Kγ时空特异性表达的调控机制,并为特定转录因子在PI3Kγ基因调控中的相互作用模式提供了新的线索。
英文主题词MAR; enhancer;PI3Kγ;PU.1;GATA2