中文摘要：

肽类药物药代动力学研究目前缺乏有效的分析手段。本项目拟从基础研究入手，根据肽类药物的特点，包括线性分子结构、不同氨基酸的等电点差异、对不同溶液和不同固体材料的特殊亲和性、电荷分布与质谱断裂规律等影响其生物样品定量分析的多种因素进行考察。深入研究肽类药物的结构与液相色谱行为的相关性、与电喷雾串联质谱行为的相关性，以及肽类药物生物样品纯化的理论基础，探讨液相色谱-质谱联用新技术在肽类药物药代动力学研究的可行性及影响因素。在此基础上提出创新思路，在肽类药物生物样品纯化的特殊方法、肽类药物特殊的液相色谱-质谱分析条件及参数优化方法方面取得明显进展，完成若干肽类药物的药代动力学研究, 获得目前尚未知的大量药物动力学信息，指导相关药物的剂型设计和安全性评价。

结论摘要：

在肽类药物的液相色谱-电喷雾串联质谱分析研究中，取得的主要进展是 ? 发现在流动相中加入挥发性离子对试剂，可以增加氨基酸的色谱保留，以LC/MS/MS实现尿中氨基酸含量测定。 ? 发现可以用柱前甲酯化，覆盖分子中的羧基，以LC/MS/MS实现血中三七素（二肽）的含量测定。该方法已成功用于药代动力学研究。 ? 发现可以采用p-CPB和p-BPB将蛋白上的巯基衍生化，然后进行蛋白酶水解生成肽段，以LC/MS/MS测定这些肽段，进而实现几种CYP450同功酶的含量测定。 ? 发现对于含有精氨酸的强碱性肽类药物，如果分子量较小，可以采用稳定同位素标记化合物作为内标，并选择适当的色谱柱，克服离子抑制对质谱检测的影响。如果分子量较大，可以采用同系物作为内标，并选择适当的色谱条件。两种方法已被分别用于4肽和9肽的药代动力学研究。上述结果表明，肽类药物的LC/MS/MS定量分析需要一些特殊的生物样品预处理方法，许多情况下需要衍生化处理，色谱-质谱分析需要设法排除内源性物质的干扰，克服离子抑制的影响。在目前的技术条件下，能够实现分子量小于1500Da的多肽高灵敏度分析并开展相应的药代动力学研究。