单细胞中活性氧组分的形态分析对研究细胞信号传导、生理病理和重大疾病的早期诊断等有重要意义。至今未见测定单细胞中不同活性氧组分形态分析的报道。本课题用高选择性的荧光探针通过细胞内衍生法,标记细胞内超氧阴离子后,首次用微流控芯片测定了癌细胞和正常细胞内超氧阴离子的含量,检测下限低达2 amol,比HPLC-荧光法低5个数量级。本研究还针对当前芯片电泳分析单细胞通量低,体细胞易贴壁堵塞微通道的现状,首次建立了高通量的单细胞分析芯片系统。通过用二维和三维鞘流聚焦,集成了单细胞连续引入、快速动态溶膜、芯片电泳及激光诱导荧光检测等功能于一体。单细胞进样速度可达到150 cells/min。用于测定人血红细胞中的谷胱甘肽和活性氧组分,达到38 cells/min 的分析通量。该方法简单易行,分析通量高,能快速分析大量的细胞。本研究还首次建立了用微流控芯片在体外模拟人体血液流动状态下细胞胞吞荧光纳米粒子的方法和特性。在动态时细胞对荧光微球的吞噬量明显下降,当流速从0.022 mm/s 增加至0.74 mm/s 时,吞噬量分别为静态测得值的74.7%和7.1%。为研究药物吸收动力学提供了新的方法。
英文主题词Single-cell analysis,Superoxide,Microfluidic chip; Continuous cell introduction,Cellular uptake.