中文摘要：

本研究克隆了泡桐丛枝植原体的免疫抗原膜蛋白（Amp）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase, SOD）基因、tRNA 异戊烯基焦磷酸转移酶基因miaA和质粒编码的读框pPaWBNyORF2、ORF3及ORF4共6个可能与植原体致病性相关的基因。同时从苦楝丛枝等植原体中克隆5个环状质粒的DNA序列，并对这些质粒特征及其编码的蛋白特征进行了预测和进化分析。以植原体侵染的泡桐组培苗为材料提取总RNA，构建了高效的用于蛋白互作筛选的泡桐cDNA文库，构建4个诱饵质粒载体，分别与泡桐cDNA文库配合进行酵母双杂交互作筛选，共从泡桐中筛选到9种已知功能的蛋白分别与植原体基因互作。利用麦胚提取物转录/翻译偶联系统对SOD和VDAC进行了体外互作验证。构建植原体miaA和泡桐核移动蛋白基因的原核表达载体，在E.coli中进行了原核表达，并制备了抗核移动蛋白的抗血清，用于检测基因表达产物。构建了ORF4 和miaA等基因的转基因双元表达载体，并通过蛋白瞬时表达和基因遗传转化途径对这些候选致病基因的生物学功能进行研究，为揭示植原体致病机制提供了依据。