中文摘要：

酵母双杂交是研究蛋白-蛋白相互作用的重要分子遗传学工具，特别是在筛选蛋白的未知受体上应用非常广泛。酵母表面展示将外源蛋白展示于细胞表面，它是研究蛋白定向进化的有力武器。申请者前期在酵母表面展示的基础上创立了酵母表面双杂交，将相互作用的蛋白展示于细胞表面，便于定量检测。在本研究中，申请者拟利用上述三个系统各自的优势，创建一个增强型的酵母双杂交系统。该系统依赖传统双杂交关于转录因子结构上可分为独立的结合结构域与激活结构域，但在功能上彼此依赖的基本原理；利用酵母表面双杂交独特而简便的载体设计，将上述双杂交体系置入单个质粒系统中。同时，借助于酵母表面展示，将报告基因展示于酵母表面，以利于检测和筛选。增强型双杂交系统与原有系统比较，检测与验证都十分容易，省时省力，非常适用于超大文库的高通量筛选。本项目拟以文库对文库筛选策略，研究流感病毒与不同宿主蛋白组的相互作用，以帮助揭示病毒跨种族传播机理。