中文摘要：

本项目按计划优化并完善了规模化研究wnt信号转导途径相关的一整套定性/定量/修饰蛋白质组学分析体系包括SILAC的双三标标记系统、TiO2填料富集磷酸化肽段、阴阳MDLC系统与LTQ-Orbitrap高精度质谱检测、两步裂解法等。建立了迄今为止国际上第一个大规模分析Wnt信号转导途径/网络的动态磷酸化修饰谱，已定性3656个不同的磷酸化位点（包括2106个新位点），其中可定量的不同的磷酸化位点占79.8%（包括1517个新位点）。我们在国际上创新性地采用两步裂解法进行乙酰化修饰的研究，已经建立了国际上第一个大规模Wnt信号转导/网络相关的乙酰化修饰图谱，包括了1510个不同的乙酰化肽段，分别对应于762个乙酰化蛋白质。发展了针对重要功能分子修饰谱和相互作用网络的蛋白质组学分析体系包括多酶联合酶切系统、TiO2填料毛细管柱富集磷酸化肽段、多反应监测MRM绝对定量技术手段等。这一系列工作建立的技术体系为蛋白质组学研究提供了新的研究策略。