中文摘要：

免疫细胞异常在骨髓增生异常综合征（MDS）发病机制中发挥重要作用。我们既往研究发现MDS存在Th1、Th2、Treg细胞和B细胞异常。CD4+CXCR5+细胞是辅助B细胞产生抗体的重要辅助T细胞。本研究拟在前期工作的基础上，以MDS患者和NUP98-HOXD13转基因小鼠为研究对象，在细胞、组织和个体各个层次分析CD4+CXCR5+细胞在MDS发病机制的重要作用。流式细胞仪分析CD4+CXCR5+细胞数量及关键细胞表面分子的表达，PCR和WB分析分选后CD4+CXCR5+细胞关键转录因子Bcl-6等基因和蛋白的表达，ELISA分析CD4+CXCR5+细胞和B细胞混合培养后的免疫球蛋白数量,免疫组化研究小鼠脾脏淋巴滤泡结构，DNA转染和RNAi技术分析Bcl-6表达增强和减低对B细胞调节的影响。阐明CD4+CXCR5+细胞在MDS发病机制中的作用，为MDS的靶向调节和治疗奠定基础。

结论摘要：

免疫细胞异常在骨髓增生异常综合征（MDS）发病机制中发挥重要作用。我们既往研究发现MDS存在Th1、Th2、Treg细胞和B细胞异常。CD4+CXCR5+细胞是辅助B细胞产生抗体的重要辅助T细胞。本研究拟在前期工作的基础上，以MDS患者和NUP98-HOXD13转基因小鼠为研究对象，分析CD4+CXCR5+细胞在MDS发病机制的重要作用。 1、MDS组患者外周血CD4+CXCR5+细胞数量、表面受体ICOS 、CD40L和OX40表达、包浆内内产生IL-21及IL-21和Bcl-6 mRNA表达水平、辅助B细胞产生抗体的水平明显高于正常对照组. 2、MDS组患者骨髓CD4+CXCR5+细胞数量明显高于正常对照组，而低危和高危组MDS患者无差异。 3、MDS小鼠滤泡辅助T细胞及其表面分子表达的研究（1）MDS小鼠骨髓中Tfh细胞数量、表面分子OX40表达水平明显低于野生型小鼠，而ICOS、CD40L的表达无明显差异；MDS小鼠骨髓单个核中PD-1 mRNA表达水平高于野生型小鼠骨髓单个核细胞PD-1 mRNA表达水平，ICOS、CD40L、OX40 mRNA表达水平明显低于野生型小鼠骨髓单个核细胞PD-1 mRNA表达水平。（2）MDS小鼠脾脏Tfh细胞表面共刺激分子ICOS、CD40L、OX40的表达均明显低于野生型小鼠，细胞表面PD-1的表达水平明显高于野生型小鼠，小鼠脾脏Tfh细胞数量与野生型小鼠相比数量降低，MDS小鼠脾脏细胞内ICOS、CD40L mRNA的表达明显低于野生型小鼠，差异具有显著性。（3）MDS小鼠及野生型小鼠脾脏细胞免疫组化结果显示MDS小鼠脾脏细胞表面CXCR5的表达明显低于野生型小鼠，而PD-1的表达明显高于野生型小鼠。 4、MDS患者外周血MDSC比例增高，并随着疾病危险程度增加而上升。综上所述，我们发现MDS患者及正常人CD4+CXCR5+细胞数量、表面分子及mRNA表达水平，发现MDS患者及正常人存在的差异。同时，比较了MDS小鼠及野生型小鼠的差异，并应用免疫组化发现了MDS小鼠及野生型小鼠脾脏细胞PD-1、CXCR5表达的不同，在细胞、组织和个体各个层次分析了CD4+CXCR5+细胞在MDS发病机制的重要作用。