中文摘要：

天然免疫功能异常是引发特应性皮炎（AD）的前提。作为重要的模式识别受体，DC-SIGN通过识别抗原表面的多糖结构活化免疫细胞。申请者及课题组研究发现，树突状细胞（DC）表面DC-SIGN的表达水平与AD疾病活动性相关；SIGNR1（DC-SIGN同源性受体）参与严重食物过敏小鼠的口服耐受；DC-SIGN还参与户尘螨介导的DC活化和前炎症因子的产生。 AD患者常见的易感病原菌和过敏原均富含多糖结构，但它们如何通过DC-SIGN引发免疫反应的机制尚不清楚。本课题拟进行AD患者DC细胞表面DC-SIGN表达、多糖抗原诱导DC活化和前炎症因子产生、指导初始T细胞活化及T型别分化，和初步进行DC-SIGN介导的细胞内信号转导通路的系列研究。试图证实DC-SIGN在AD免疫功能异常中所发挥的作用及分子机制，以期为AD发病机制的研究提供新的切入点。检索已发表文献，未见AD此方面的研究报道。

结论摘要：

特应性皮炎（atopic dermatitis，AD）是一种具有代表性的过敏性疾病。在过去的三十年间，该病的发病率快速攀升。天然免疫功能异常是引发AD发病的前提和基础。作为重要的天然免疫受体，C型凝集素受体（C-type lectin receptors, CLRs）通过识别病原体或过敏原表面的“糖指纹”，来传递外源信号和活化免疫细胞。很多AD患者易感过敏原都富含多糖结构，但是目前尚不清楚它们具体是如何通过DC-SIGN而活化DC、从而诱导特定型别T细胞免疫反应的。为此，本研究拟深入探讨DC-SIGN在AD患者免疫功能异常中所发挥的功能作用机制。为此，本课题围绕着以上问题进行了以下的系统研究①检测不同严重度AD患者皮损区树突状细胞上DC-SIGN表达情况的研究，并分析其与疾病的相关性在本部分实验中采用激光共聚焦和流式细胞技术进行了健康对照者、轻中度AD患者、重度AD患者皮损内CD11c+细胞上DC-SIGN表达量分析，并将DC-SIGN的表达量与疾病的严重度进行了相关性分析，发现皮损内CD11c+DC细胞上DC-SIGN的表达量随着病情的加重而增加。②DC-SIGN与过敏原结合能力的研究首先采用ELISA方法进行了体外DC-SIGN-Fc与数种AD常见过敏原（树木花粉、草花粉、猫毛、狗毛、尘螨、鸡蛋白等）的结合能力研究，发现随着过敏原浓度的递增，过敏原与DC-SIGN-Fc的体外结合能力逐渐增强；然后构建了细胞表达DC-SIGN模型，将含有DC-SIGN基因序列的质粒转染进HEK293T细胞，获得瞬时表达后，利用激光共聚焦技术和流式细胞技术检测了细胞表达DC-SIGN与尘螨抗原和鸡蛋白抗原的结合情况研究，发现当过敏原与转染了DC-SIGN的293T细胞孵育3小时后，细胞表达的DC-SIGN可以有效摄取过敏原，并介导内吞入细胞内。③过敏原通过DC-SIGN活化DCs后诱导的前炎症细胞因子产生状况及对初始T细胞型别分化的影响在进行过敏原刺激前，先将实验组分为抗MyD88抗体和/或DC-SIGN封闭抗体预处理组和不处理组，然后将尘螨和鸡蛋白抗原与AD患者MoDCs细胞共培养，采用ELISA方法检测上清液中的IL-10、IL-12、IL-6和TNF-a的分泌水平，同时进行细胞表面CD80、CD86、HLA-DR等的表达，以明确过敏原经DC-SIGN通路对DC细胞活