中文摘要：

特应性皮炎发病机制不明，很多研究停留在特异性免疫应答的层面，如Th1与Th2细胞的分化状态及后续的炎症反应及组织损伤。最近研究表明，皮肤屏障功能损伤可能是引发特异性皮炎的始动原因。本研究利用体外培养的人皮肤OTC 模型分析蛋白酶激活受体2（PAR2）异常活化对皮肤屏障功能的影响，从免疫学与组织病理学的角度阐明特异性皮炎发病的相关机理。主要研究内容有1）在皮肤角质形成细胞中，PAR2表达与活化的调控机制；2）PAR2的异常活化对角质形成细胞介导的皮肤屏障功能的影响及相关机制；3）研究PAR2的异常活化在诱导特应性皮炎发病过程中的作用，探索针对PAR2为靶点的特应性皮炎抗炎治疗新途径；其结果可以进一步揭示PAR2的异常活化对皮肤屏障功能的影响，认识PAR2表达与活化的分子调控机制。因此，本研究可以从更深层次上阐明特应性皮炎的发病机理，同时为建立特应性皮炎的新型治疗手段提供实验依据。

结论摘要：

特应性皮炎发病机制不明，最近研究表明，皮肤屏障功能损伤可能是引发特异性皮炎的始动原因，很多研究停留在特异性免疫应答的层面，如Th1与Th2细胞的分化状态及后续的炎症反应及组织损伤。蛋白酶激活受体2 (PAR2) 是一种新近发现的G蛋白相关的受体超家族成员，这种受体在表皮中的表达及活化可以干扰皮肤的正常屏障功能，并引发炎症反应。虽然PAR2的研究目前已取得了许多突破性进展，但这一受体的激活调控机制以及其在特应性皮炎中发病过程中的作用，尚不十分清楚。本研究利用体外培养的人角质形成细胞及皮肤OTC 模型，分析PAR2异常活化对皮肤屏障功能的影响，研究PAR2激活的调控机制，从免疫学与组织病理学的角度阐明特异性皮炎发病的相关机理及可能的治疗靶点。主要研究内容包括1）在皮肤角质形成细胞中，PAR2表达与活化的调控机制；2）PAR2的异常活化对角质形成细胞介导的皮肤屏障功能的影响及相关机制；3）研究PAR2的异常活化在诱导特应性皮炎发病过程中的作用，探索针对PAR2为靶点的特应性皮炎抗炎治疗新途径；其结果可以进一步揭示PAR2的异常活化对皮肤屏障功能的影响，认识PAR2表达与活化的分子调控机制。结果显示1）PAR2的激活引发细胞内钙流释放; PAR2的识别，具有底物多肽序列的特异性；PAR2的特异性激活肽，可以激活PAR2，引发细胞钙流释放；而PAR2的拮抗肽，可以抑制PAR2的活化，减少其活化引发的细胞钙流释放；2)在特应性皮炎的患者中，PAR2的表达水平异常增加，伴随着组织激肽释放酶KLK5与KLK7表达水平的增加; 3) PAR2的底物的刺激，可以直接诱导体外培养的OTC模型产生组织病理变化，同时，在培养基上清中可以检测到不同水平的炎性细胞因子。利用KLK5、KLK7过表达的皮肤角质形成细胞构建OTC培养模型，我们发现KLK5、KLK7的过量表达可以引起OTC的组织形态学异常, 其中，KLK5的过表达可显著促进角质形成细胞的增殖，使PAR2阳性的细胞数量增加；同时，KLK5、KLK7的过量表达可以诱导OTC模型分泌炎性介质产生明显的炎症反应。因此，本研究可以从更深层次上阐明特应性皮炎的发病机理，同时为建立特应性皮炎的新型治疗手段提供实验依据.