血吸虫病流行广泛,危害严重。血吸虫雌雄合抱是雌虫发育成熟的前提,成熟雌虫所产的大量虫卵又是造成宿主主要病理损害和疾病再传播的原因。血吸虫雄虫特异表达的抱雌沟蛋白具有影响雌雄合抱的效应。本课题在已有基础上,利用酵母双杂交技术,对日本血吸虫抱雌沟蛋白相互作用分子进行了筛选,最终获得23个在酵母体系内与血吸虫抱雌沟蛋白相互作用的分子。利用免疫共沉淀(Co-IP)技术证明在哺乳动物细胞体系内抱雌沟蛋白与SjLGL,SjCol-Ⅴ间存在着相互作用,免疫组化技术也证实SjGALE,SjGAPDH-24,Sj34.9,SjActin-а-2,SjTWF与抱雌沟蛋白在空间结构上的存在相互作用性的可能性。利用基因芯片杂交、RNA干扰、Real-time PCR等技术研究发现抱雌沟蛋白及其相互作用分子对血吸虫生长发育、形态结构、虫卵孵化(减虫卵孵化率可高达85%)、雌虫产卵能力等有显著影响。对其及相互作用分子诱导的免疫机制分析发现可以诱导机体产生对寄生虫感染具有保护性的Th1型免疫反应。本研究对阐明雌雄合抱和血吸虫发育生殖的调控机制有重要理论价值,对开拓抗血吸虫生殖发育新途径有实践意义。
英文主题词Genocopheral Canal Protein;yeast two—hybrid;Co-IP;gene chip;RNAi