中文摘要：

本项目组前期收集到一个遗传性厚甲伴脱发的大家系，通过基因突变筛查发现家系患者存在编码缝隙连接蛋白connexin 30的GJB6基因G11R错义突变，从基因水平确诊该家系为有汗性外胚叶发育不良。目前该病的发病机理仍未明确，该基因突变后会引起缝隙连接功能发生何种变化，进而引发临床症状，是亟待解决的问题。本研究拟通过定点突变技术获得已知的4种connexin 30突变体（G11R、A88V、V37E和D50N），用其转染细胞，检测野生型和突变型Connexin 30在原代角质形成细胞、HaCaT细胞及宫颈癌HeLa细胞的亚细胞定位，实时荧光定量PCR和免疫印迹法分析野生型和突变型Connexin 30对角质形成细胞分化标记蛋白的调节及其与MAPK、PKC等信号转导通路的相互作用。本研究不仅有助于揭示有汗性外胚叶发育不良的发病机理，还将进一步探讨缝隙连接蛋白突变与相关疾病的关系。

结论摘要：

本项目组前期收集到一个遗传性厚甲伴脱发的大家系，通过基因突变筛查发现家系患者存在编码缝隙连接蛋白connexin 30的GJB6基因G11R错义突变，从基因水平确诊该家系为有汗性外胚叶发育不良。目前该病的发病机理仍未明确，该基因突变后会引起缝隙连接功能发生何种变化，进而引发临床症状，是亟待解决的问题。本研究拟通过定点突变技术获得已知的4种connexin 30突变体（G11R、A88V、V37E和D50N），以Tet-on慢病毒为载体建立稳定表达GJB6基因及其突变体的HaCaT细胞株，使用流式、cck8、实时荧光定量PCR和免疫印迹法分析野生型和突变型Connexin 30对角质形成细胞分化标记蛋白的调节及其与凋亡、MAPK、PKC等信号转导通路的相互作用。目前我们课题组研究发现突变型可以引起caspase3、caspase-8、caspase-9 and PARP等凋亡指标的改变。本课题组将进一步对其他通路进行研究，是其发病机制明确。本研究不仅有助于揭示有汗性外胚叶发育不良的发病机理，还将进一步探讨缝隙连接蛋白突变与相关疾病的关系。