中文摘要：

糖尿病（DM）血管并发症是DM患者的主要死因，探明DM诱发血管衰老的分子机制尤为重要。课题组前期研究发现Hcdc14A是重要的细胞周期调控蛋白，高糖高脂低氧环境可下调Hcdc14A和G-CSF受体（G-CSFR）表达,诱导血管内皮细胞（VEC）衰老，G-CSFR与Hcdc14A之间存在相互作用。课题组拟在前期工作基础上，进一步深入研究Hcdc14A介导糖尿病性血管衰老逃逸的调控机制。观察糖尿病性脑血管病动物和细胞模型VEC和平滑肌细胞（VSMC）中Hcdc14A及细胞衰老的变化，探讨G-CSFR促衰老逃逸作用的分子机制。通过生物信息学预测G-CSFR对Hcdc14A的调控位点并探明其调控机制。观察调控G-CSFR基因表达是否对 VEC和VSMC中Hcdc14A、端粒酶活性、衰老基因表达、染色体排列以及细胞功能学等产生影响。为阐明进而干预糖尿病血管并发症的发生发展提供新的理论依据和研究靶点。

结论摘要：

糖尿病（DM）血管并发症是DM患者主要死因，探明DM性血管衰老分子机制至关重要。本研究发现hCdc14A在有丝分裂间期定位于中心体，分裂期定位于纺锤体两端。高糖高FFA低氧显著下调hCdc14A表达，并影响cyclin B、cyclin D、cyclin E和p53等周期蛋白，减少细胞增值并增加细胞凋亡。过表达hCdc14A可加速细胞周期，促进细胞增值。下调hCdc14A后则表现出相反作用。进一步证实hCdc14A是参与和调控细胞损伤的主要通路之一。 研究发现高糖高FFA能刺激人脑血管平滑肌细胞（HBVSMC）过度增殖，应用Egb761可减轻病理性刺激，抑制HBVSMC过度增殖，降低LDH释放，降低NF-kB p65和beclin1表达。Egb761在SH-SY5Y细胞OGD模型中可减少凋亡，降低LDH，减少p-AKT、NF-kB P65和BECN1表达。并合成了一个新型羟基脂肪酸有机化合物PAHSA，正在2015年新中标的国自然面上项目中着手深入研究其抗炎和抗动脉硬化潜能。 研究发现人胚胎神经干细胞（hNSCs）治疗脑组织丢失和白质损伤效果显著，显著改善感觉运动障碍及认知缺陷。hNSCs能促进NF-kB转位，下调IL-1β表达。缺血缺氧损伤24h内给于hNSCs具有一定保护作用。 研究发现G-CSF可提升hCdc14A、cyclinB和cyclinE周期蛋白，抑制p53活性，活化细胞周期。高糖高脂低氧刺激不仅可激活细胞外ERK1/2和Akt,还可使JNK和p38失活。G-CSF可通过MAPK和Akt通路减轻HBVECs损伤。研究还发现，GSH可通过激活Akt减轻FFA引发的细胞损伤、氧化应激和凋亡。 研究发现DM小鼠存在认知障碍。头颅MRI发现DM小鼠多数伴有白质疏松、腔隙性脑梗死以及脑萎缩等脑小血管病变。电镜提示DM小鼠脑细胞存在线粒体水肿、脂褐素增加及自噬障碍等特征性改变。应用G-CSF和Egb761可提升DM小鼠脑内Beclin1，降低NF-κB，增加保护性自噬，改善小鼠认知功能。 以上研究提示G-CSF、Egb761和GSH都可能是治疗DM性脑血管病的潜在手段。 本课题初步探明Hcdc14A和G-CSFR在DM性脑血管衰老中的分子机制，为阐明进而干预DM血管并发症的发生发展提供新的理论依据和研究靶点。