双光子激发荧光显微光学成像与转基因荧光标记技术相结合,为穿颅活体皮层神经环路可塑性研究提供了重要手段,但混浊的颅骨限制光的穿透深度,现有颅窗并不稳定。本项目提出建立“可开—关”的稳定颅窗,研究其在穿颅活体皮层神经光学成像的有效性、安全性与可靠性。具体如下发展高效的颅骨光透明方法,建立基于光透明颅窗的皮层神经亚细胞结构树突棘成像方法;跟踪观测光透明颅窗对皮层小胶质细胞、星形胶质细胞的激活及皮层微血管结构与功能的影响,探讨其在活体应用的安全性;监测正常环境及丰富环境中皮层神经元亚细胞结构树突棘长消变化,并与磨薄颅窗穿颅活体成像结果比较,评价光透明颅窗实施穿颅活体皮层成像的可靠性。本项目的研究成果有望突破穿颅活体皮层光学成像研究中的颅骨障碍,为实时、在体、跟踪神经环路可塑性提供安全、可靠、简便易行的视窗。这对研究情感与记忆机理、揭示神经性疾病发病机制、发展有效治疗方法至关重要。
英文主题词optical clearing of skull;in vivo imaging;cortex;neuro;dendritic spin