中文摘要：

近年研究表明中枢神经损伤后不能再生,是因为中枢神经存在髓鞘相关抑制分子(Nogo,MAG,OMgp)。2001年初，Nogo66受体NgR被发现。NgR与神经营养因子受体p75组成的受体复合物可以传递Nogo、MAG和OMgp的抑制信号，但抑制NgR表达不能获得理想的促进轴突再生的结果。2008年，学者发现可以结合Nogo、MAG和OMgp的受体PirB，敲除PirB基因可促进脊髓损伤后轴突再生。我们拟分别建立PirB基因敲除、NgR基因敲除小鼠模型，包装rAAV5-PirBsiRNA-GFP，在体内和体外观察PirB基因敲除、NgR基因敲除、NgR基因敲除小鼠转染rAAV5-PirBsiRNA-GFP以及单纯转染rAAV5-PirBsiRNA-GFP对视神经损伤后轴突再生的影响，进行对比研究，探讨PirB在视神经再生机制中的意义，为视神经损伤后修复的治疗寻找新的方法。

结论摘要：

近年研究表明中枢神经损伤后不能再生，是因为中枢神经存在髓鞘相关抑制分子（Nogo，MAG，OMgp）及其受体NgR，但抑制NgR表达不能获得理想的促进轴突再生的结果。2008年，学者发现可以结合Nogo、MAG和OMgp的受体PirB，敲除PirB基因可促进脊髓损伤后轴突再生。我们在成功建立定量成年小鼠视神经损伤模型和建立小鼠视网膜神经节细胞体外培养体系基础上，利用PirBsiRNA质粒，包装rAAV-PirBsiRNA-GFP，建立敲除PirB基因小鼠模型，应用40g力视神经损伤夹对其进行视神经夹伤，采用免疫荧光、激光共聚焦、分子生物学等技术在体内和体外分别观察PirB基因敲除、NgR基因敲除、NgR基因敲除鼠玻璃体腔内注射rAAV-PirBsiRNA-GFP、单独转染rAAV-PirBsiRNA-GFP对视神经损伤后轴突再生的影响，并进行对比观察，同时检测与PirB作用密切相关的SHP-1，SHP-2，DAP-12，C1q，synapsin表达的变化。结果表明基因敲除PirB或NgR ，以及转染rAAV-PirBsiRNA-GFP不影响视神经中MAG、Omgp的表达。PirB基因敲除可促进视神经损伤后轴突再生和体外培养RGC轴突生长，NgR基因敲除鼠转染rAAV5-PirBsiRNA-GFP促进视神经损伤后轴突再生的作用最强。PirB和NgR为抑制视神经损伤后再生的重要基因，PirB的抑制作用强于NgR。PirB可能通过SHP-1/SHP-2途径起作用。本研究探讨了PirB基因在抑制视神经再生机制中的意义及其作用机制，为进一步研究PirB在中枢神经损伤后的作用奠定了基础，为视神经损伤后修复寻找新的治疗方法进行了探索。