中文摘要：

前期的筛选实验显示，某些海绵化学防御功能激发后，其提取物的抗菌活性相比之前增强较为显著。这可能是由于该海绵在化学防御过程中，通过生物转化途径生成了某些具有抗菌活性的次生代谢产物。本项目将这种海洋化学生态学的研究思路，运用到海洋天然活性成分的筛选中，对筛选出的南海海绵Callyspongia sp.进行化学防御功能激发后的抗菌活性成分研究。通过创伤操作激活海绵的化学防御功能，运用现代色谱学的分离手段和波谱学的结构鉴定技术，结合抗菌活性筛选实验，快速分离鉴定并筛选出海绵中的抗菌活性成分，并通过HPLC分析化学防御前后次生代谢产物的变化，探讨生物转化途径。这种更加主动性的研究方法大大提高了海洋抗菌活性成分获取的几率，为海绵来源的抗菌药物先导物的研发和深度开发南海丰富的海绵资源奠定基础。这种基于化学防御- - 生物转化- - 活性化合物相互关系的研究方法，为研究海洋活性成分或药物先导物提供新的研究思路。

结论摘要：

“在海洋生物化学防御物质中寻找药用活性成分”是近年来海洋天然药物研究的重要思路，本项目主要研究海绵化学防御功能激发之后的药用活性成分。我们发现海绵Callyspongia sp.经创伤操作激活化学防御功能后，其提取物抗菌活性显著增强。在两批化学防御激活的Callyspongia sp.海绵样本中，我们分离鉴定了78个化合物，其中9个新化合物，并筛选得到了多个抗菌活性成分，同时建立HPLC分析方法以进一步制备。其中一个新化合物经过动物实验确定具有较好的体内抗细菌活性，可作为抗菌先导化合物具有进一步研究价值。在桶状海绵Xestospongia testudinaria鱼拒食的化学防御活性提取物中分离并鉴定了21个化合物。化学防御物质的药用活性筛选显示，一个含溴四氢呋喃类的新化合物mutafuran H具有较好的乙酰胆碱酯酶抑制活性，并确定为药用价值较好的非竞争性抑制剂。推导了两个过氧化羟基甾醇在海绵体内的转化过程，并确定其中一种为海绵化学防御激活后是产生的活性物质，同时筛选发现对多个药用靶点具有抑制活性。本项目除了在海绵化学防御物质中筛选和发现药用活性成分，还对研究对象进行了适当的延伸。如在蕾二歧灯芯柳珊瑚抗藤壶附着化学防御物质八放烷二萜类化合物中，筛选发现具有较好的NF-κB-luciferase和AMPK抑制剂，并与抗附着活性化合物具有相同的活性基团。本项目筛选发现的若干活性物质具有进一步研究价值，有望成为海洋药物先导化合物，同时本项目也为“在海洋生物化学防御物质中寻找药用活性成分”提供了成功的实例。