一、内容1.继续采用大孔树脂、制备液相以及液质联用、核磁等技术对养阴通脑颗粒整方和各单味药中有效部位及其相关成分分离、分析;按正交试验法组成各有效部位(黄酮、生物碱、皂甙、挥发油类等)用量配比不同9个组方。2.采用脑缺血后神经元死亡数量;谷氨酸(Glu)释放量,钙超载,神经元凋亡等指标研究9个组方作用。3.采用脑缺血动物模型等,对9个组方在体外与其在血、脑的成分进行HPLC测定,得各组方代表成分谱。4.对各组方与其药理数据进行逐步回归分析;各组方HPLC数据与其药理数据逐步回归分析等。二、意义可有效分析各主要有效部位及其母方主辅,组效与量效及其相辅相成,或相反相成内在配伍关系;为中药复方内在配伍定量化和质量标准化研究进行有意义尝试。寻求出具有抗脑缺血作用的最佳有效部位组合;为开发出治疗本病具有确切疗效的中药新药(有效部位群)奠定基础。阐述本病病因病机,开拓治疗思路。
探索本复方有效部位和有效成分作用及其配伍效应为临床合理用药提供思路。经三年时间已按研究计划圆满完成任务。研究内容和重要结果利用现代化学分离分析制备了养阴通脑颗粒主要活性物质及相关专属成分。建立了HPLC测定大鼠口服复方有效部位组合后血浆中葛根素和川芎嗪方法。利用体外培养海马神经元糖氧剥夺损伤模型,川芎嗪具有钙拮抗作用。建立Aβ25-35诱导海马神经元损伤模型,葛根素、川芎嗪有抗自由基损伤作用,具有协同作用。川芎嗪有调节内皮细胞分泌功能。黄酮有抗凝,提高纤溶活性,抑制MMP9表达,提高bcl-2蛋白表达。葛根素可减少脑细胞氨基酸释放等。正交法组成养阴通脑颗粒主要有效部位(黄酮、生物碱、挥发油等)用量配比不同组方,葛根素和川芎嗪为代表,检测到较佳配伍组葛根素和川芎嗪药动学房室模型均为二室开放模型,吸收较快,消除较慢,配比为黄酮60,生物碱150,皂甙100,挥发油10(mg/kg/24h。),表明中药复方药效与活性成分配伍及代谢有相关性,可为中药复方组方配伍提供研究方法。撰写学术论文14篇,已在核心期刊发表学术论文6篇(带标注),参加国内学术会议2次,培养硕士生4名,博士生2名