中文摘要：

线粒体基质蛋白3-氧酸辅酶A 转移酶(SCOT)是酮体代谢的重要限速酶，其功能异常会直接影响组织的能量代谢，但SCOT酪氨酸硝基化修饰位点以及其与蛋白的酶动力学特征的研究尚不清晰。在本项目中，我们选用db/db 小鼠II型糖尿病动物模型，检测到SCOT的酪氨酸硝基化的修饰水平增高，同时，还采用重组表达后用过氧亚硝酸处理和iNOS基因定位表达技术，导致高NO应力，也检查到SCOT的硝基化饰程度增加；运用LC-ESI-MS/MS质谱技术鉴定发生该修饰的位点,通过分子量增加45D的特点，鉴定到第4和76的酪氨酸可能为硝基化修饰位点，进而利用定点突变技术，采用体外实验确定这些修饰位点以及他们的确影响了SCOT酶活性；利用含该修饰位点的抗原制备特性性抗体，从而实现简便的对影响SCOT活性的修饰位点进行检测，结果表明在糖尿病情况下线粒体蛋白质SCOT的第4和76的酪氨酸硝基化修饰明显增高。通过项目研究为检测SCOT的修饰与糖尿病的相关性提供了新的途径。