中文摘要：

本项目拟采用永久性结扎双侧颈总动脉(BCCAO)血管性痴呆(VD)动物模型，以D-serine为切入点，探讨胶质细胞-神经元交互作用在VD发生发展中的作用，系统揭示神经元进行性病变死亡的机制，探索潜在的治疗靶点。具体验证以下假设①VD急性期星形胶质细胞释放D-serine增加，诱导神经元兴奋毒性，其机制涉及星形胶质细胞GluR2表达下调和谷氨酸受体结合蛋白(GRIP)的调控作用；②VD进行性病变期小胶质细胞活化，诱导tau蛋白超磷酸化和Ab的生成，进而诱导神经元D-serine合成增加，致使NMDA受体过度开放，突触神经元损伤，大鼠学习记忆障碍；③长期生理剂量雌激素通过诱导nNOS活性、稳定泛素-蛋白酶体系统，降低Tau磷酸化和Ab生成，从而降低D-serine水平、保护神经元损伤、逆转学习记忆缺陷。

结论摘要：

血管性痴呆（VD）是缺血性脑血管性疾病所致的进行性认知功能障碍，发病率仅次于老年性痴呆，占痴呆发病率的15-20%。目前，临床上尚无明确的神经病理学的VD诊断标准和有效的治疗措施。本研究对大鼠实施永久性结扎双侧劲总动脉 (BCCAO) 从而诱导血管性痴呆模型，研究VD不同阶段的分子机制，并探讨17β-雌二醇 (E2)的有益作用。研究发现 (成年雄性SD大鼠) 1)VD早期 (BCCAO7d, 21d), 海马CA1区内源性d-serine水平升高，并通过上调NADPH氧化酶活性诱导氧化-抗氧化失衡；2) VD早期(BCCAO7d, 21d), 各组大鼠 (sham控制组、BCCAO组和E2处理组) 空间学习记忆能力无显著差异。但在BCCAO 3m大鼠空间学习能力无显著差异，而其空间记忆能力较年龄匹配的sham组大鼠显著降低；其分子机制与轴突损伤、突触蛋白表达降低及树突棘数量的减少密切相关。3) BCCAO 6m（VD晚期）组与年龄匹配的sham控制组组大鼠相比海马CA1区生存神经元数量显著减少，同时大鼠海马依赖的空间学习记忆缺陷。其分子机制与泛素化水平升高、tau过度磷酸化及Aβ1-42沉积有关。有意义的是，持续给予E2三个月可显著改善BCCAO诱导的空间学习记忆缺陷。4) BCCAO 3m和6m均可导致海马CA1区促炎症因子CD11b、Cleaved IL-1β蛋白表达，D-丝氨酸合成关键酶丝氨酸旋化酶表达降低或给予E2替代治疗可显著降低此慢性炎症反应。 (成年雌性SD大鼠) 5) 手术绝经的大鼠对BCCAO诱发的缺血性损伤较雄性大鼠敏感，与年龄匹配的sham控制组相比BCCAO3 m即可导致海马CA1区生存的锥体神经元数量显著降低，大鼠空间学习、记忆功能显著下降。6) BCCAO后大鼠脑血流快速降低，于BCCAO 14d逐渐恢复，19d时脑血流量回复到Sham组水平。7) BCCAO早期即可导致血管结构损伤，这种损伤可持续到BCCAO后3m；生理剂量E2替代治疗不但可显著降低血管超微结构损伤、降低IgG渗漏，而且也增加了皮层和海马CA1区的血管密度；其分子机制可能与E2可上调VEGF蛋白表达相关。此研究揭示了VD进行性病变的分子机制，D-serine可能是防治VD的重要靶点，慢性17β-雌二醇替代可能是有效的干预措施。