本项目研究肝癌细胞内甲胎蛋白(AFP)与维甲酸受体(RAR)-β相互作用。采用免疫共沉淀(Co-IP)技术分析AFP与RAR-β的相互结合情况,用激光共聚焦显微镜技术观察AFP与RAR-β在细胞内的共定位状况和观察全反式维甲酸作用于肝癌细胞后AFP对凋亡信号分子caspase-3的迁移影响;采用荧光共振能量转移(FRET)技术研究AFP与RAR-β相互作用;运用RNA干扰技术分析干扰AFP表达后肝癌细胞对全反式维甲酸的敏感性以及采用染色体免疫共沉淀技术(ChIP)研究RAR-β对肝癌细胞存活基因survivin转录调节的影响。结果发现AFP能与RAR-β相互作用并抑制RAR-β的转录调节功能,同时也发现AFP具有抑制caspase-3的活性和向核内迁移的特性。在研究过程中,还发现AFP通过抑制PTEN的活性促进AKT(Ser473)的磷酸化,导致CXCR4的表达。本项目研究发现(1)AFP能抑制RAR-β的转录调节功能;(2)AFP能抑制凋亡信号caspase-3的传递;(3)AFP具有促进PI3K/AKT信号途径信号传递的作用。
英文主题词Alpha fetoprotein; Hepatocellular carcinoma;Retinoic acid receptor receptor-β; Signal transduction