中文摘要：

肾虚耳聋是感音神经性聋中医辩证中的常见类型。目前其发病机理用现代医学理论仍无法得到合理解释，亦无公认有效的治疗药物。补肾方剂是申请者通过23年的实验研究和临床应用创制的系列中成药，对肾虚耳聋的临床疗效显著，动物实验证明对听毛细胞的结构和功能有恢复作用。本项目应用基因芯片和蛋白质芯片技术，在原有成果的基础上，进一步探讨补肾方剂对肾虚耳聋大鼠耳蜗actin、myosin、harmonin、cadherin等与内耳毛细胞结构功能密切相关的蛋白质水平及其基因表达的影响，从基因调控水平和蛋白质水平全方位揭示补肾方剂治疗肾虚耳聋的分子生物学机制，同时阐明中医肾与耳联系的物质基础和生化机理。本项目将对中医肾虚耳聋的基础研究及临床治疗学等方面有重要理论意义和广泛应用前景。

结论摘要：

本课题应用蛋白质组学技术研究补肾方剂治疗肾虚耳聋的分子机制，以shotgun蛋白质总鉴定方法准确检测耳蜗膜性成分总蛋白质，采用一维高效液相色谱和电喷雾串联质谱，建立ESI-1DLC-MS/MS技术平台。研究结果表明，铁缺乏诱发肾虚大鼠内耳听毛细胞及其相关细胞出现大量未知结构和分子生物学功能的蛋白，分子量范围为8421Da～1252882Da,等电点(isoelectric point; PI)范围为3.66～12.33，肾虚可导致肌动蛋白、肌球蛋白等重要细胞骨架蛋白的表达降低，结蛋白表达增强，导致感音神经性聋。研究结果证实，补肾方剂治疗对肾虚耳聋大鼠听毛细胞静纤毛的损伤具有一定修复作用，可能通过增强耳蜗重要功能蛋白如肌动蛋白、肌球蛋白等蛋白质表达，减弱结蛋白表达，从而改善缺铁诱发肾虚耳聋大鼠的听觉功能。