转基因植物中传递性RNA沉默在植物抗病毒机制中具有重要意义,有关传递性RNA沉默延伸的长度范围极限及传递性RNA沉默能否向反向重复结构(Inverted repeats,亦称Stem-loop)转基因的环区(loop区)延伸以及温度的影响是尚待解决的问题。本项目在前期工作的基础上拟探明沉默向转基因的Loop环区延伸的可能,以及RNA介导抗病毒转基因植物中传递性RNA沉默从引发沉默的dsRNA(反向重复转基因的转录产物为初级靶标)沿5'-3' 方向(下游方向)和3'-5'方向(上游方向)向相连的侧翼序列即次级靶标(与引发RNA沉默的起始dsRNA无同源性)传递延伸的长度极限(核苷酸长度),以及并探讨温度对传递性RNA沉默的影响。通过开展研究,探明了RNA沉默可以向loop区的基因序列延伸,而且引起的沉默效应是系统性的;探明了传递性RNA沉默在抗病毒转基因植物中可以向起始沉默的双链区上下游侧翼序列延伸,测得的向上游延伸距离250bp,下游更长出3-4.4倍距离;同时初步的研究表明,温度升高(在25-30℃范围)能促进RdRp活性表达,增强传递性RNA沉默的效应。
英文主题词Transitive RNA silencing;dsRNA;virus resistant transgenic plant